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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RT
- 英文名:
1-(1-Methyl-1H-imidazol-5-yl)ethanone
- 库存:
99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- CAS号:
20970-50-7
- 规格:
100mg
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文献和实验常用的微量蛋白质快速测定方法。 考马斯亮蓝G-250染液的配制:称取100mg考马斯亮蓝G-250,溶于50mL 90%乙醇中,加入85%(W/V)的磷酸100mL,最后用蒸馏水定容到1000mL。此溶液在常温下可放置一个月。 采用Bradfold法进行蛋白定量,以1 mg/mlBSA 制作标准曲线。 首先,配1mg/ml BSA(1mg BSA溶于1ml三蒸水),按下表配置梯度浓度的标准溶液。 浓度
的蛋白质样品(1-100??g)也能分离得很好,分辨率高使血清蛋白质可获得近20多个区带。 (二)试剂和器材 1.测试样品 血清蛋白、脱盐后的IgG、纯化后的IgG。 2.试剂 (1)制备分离胶、浓缩胶有关试剂 ① 凝胶缓冲液:称取1mol/L HCl 48ml,Tris(三羟基氨基甲烷)36.6g,TEMED(N,N,N`,N`-四甲基乙二胺)0.23ml,加重蒸水至80ml使其溶解,调pH8.9,然后加重蒸馏水定容至100
步骤 (1)用包被Buffer稀释的重组人TFAR19(1mg/ml)包被ELISA板, 100ml/well, 37℃孵育2h或4℃过夜(一般24h以上)。 (2)洗涤Buffer洗板三次,加入封闭液,200 ml/well , 37℃孵育2h或4℃过夜。 (3)洗涤Buffer洗板三次,加入不同稀释度的病人血清(3个重复孔)100ml/well ,37°C孵育1h。设包被Buffer、洗涤Buffer 、封闭液为阴性对照。 (4)洗涤Buffer洗板三次,加入1:2500稀释的HRP标记的抗
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