4-溴-2，6-二氯-1H-苯并[d]咪唑;1035390-

微管蛋白的可溶性表达及纯化

mM咪唑）悬浮，100ml用5~10ml缓冲液（约当2~5ml每克菌量），视悬浮后的菌液浓度而定；5、反复冻融法破碎细胞：做到14步时由于时间原因不能立即继续后面的操作，可将菌悬液放于-70℃冰箱中冷冻；也可用反复冻融的方法来破碎细胞，在-70℃冻融，在室温下溶解，反复冻融3~4次；6、加Lysozyme至1mg/ml（1ml加10ul），在冰上孵育30min~1h；7、200~300W超声破碎，2s×30次，停顿2s；若菌种较多可以增加破碎次数。注意超声破碎时间，不可太长，否则温度升高易导致蛋白

Ames 试验（沙门氏菌回复突变试验）方法及导则

试验的操作步骤进行。将受试物换成诊断性诱变剂。结果判断：标准菌株对某些诊断性诱变剂特有的回变结果参见表 2。 表 2 测试菌株的回变性诱变剂剂量(mg)S9TA97TA98TA100TA102柔毛霉素叠氮化钠ICR—191链霉黑素丝裂霉素 C2,4,7 -三硝基- 9 -芴酮4 -硝基-O-次苯二胺4 -硝基喹啉-N-氧化物甲基磺酸甲酯2 -氨基芴苯并（a）芘6.0 1.5 1.0 0.25 0.5 0.20 20 0.5 1.0 10 1.0 ----

垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质

梳孔。(3)加样用微量注射器分别吸取10mg/l 的标准蛋白样品50μl，上面加20%甘油1滴，溴酚蓝指示剂1滴，再用滴管小心加入少量电极缓冲液使之充满梳孔。(4)电泳将电极缓冲液分别倒入上下电泳槽，接通电源，调节电压为300V，待溴酚蓝移至凝胶底部1～1.5cm时，切断电源。(5)染色将凝胶从玻璃板上取下，放入染色缸中染色20～30min，然后放入7%醋酸中脱色至背景脱尽为止。(6)鉴定根据染色所出现的区带，分析样品的纯度。