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2-8℃,12个月
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99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- 规格:
20L
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文献和实验4 加水定容到终体积。 5 必要时用1 mol/L 盐酸和1 mol/L 氢氧化钠调节pH。 6 用无菌0.22um滤膜过滤除菌,分装于无菌血清瓶中,4℃冰箱保存。 配制好的培养液用前加入100U/mL青霉素和100U/mL链霉素,并根据需要加入血清(5%-20%)。 DMEM培养基应用广泛。基于DMEM培养基中氨基酸、微生物含量丰富,并具有糖酵解中的丙酮酸和微量Fe离子,因此在细胞培养 、疫苗生产等方面的应用最为常见。
上继代1次。灭菌前把所有培养基的pH值用1M的HCl或NaOH调节为5.6,然后在121℃、131Kpa的条件下灭菌20min。培养温度为25±1℃,光照强度2500Lx,光照16h、黑暗8h。 3. 离体叶片再生 从转移生长20d左右的无菌苗顶部,摘取刚展开幼嫩叶片,用无菌刀垂直于叶片中脉横切伤,使叶片产生多个伤口,然后把叶片接种在不同的诱导培养基上。分析基本培养基对再生的影响。所有培养基中均含0.6%琼脂,3%蔗糖(蔗糖浓度试验除外)。接种后先黑暗
15 min,然后在 65 ℃ 水浴中使胶融化;(2)加入等倍体积 TE-饱和酚,剧烈振荡 30 秒钟,然后-70 ℃ 冷冻 15 min;(3)室温融化后,12,000 rpm 离心 5 min,将上层水相移至另一离心管中,用 2.5 倍体积乙醇和 0.1 倍体积 3 mol/L NaAc(pH5.2) 沉淀 DNA 片段,离心后的沉淀用 75% 乙醇漂洗一次,室温干燥 DNA,用双蒸水或 TE 缓冲液溶解 DNA 后,-20 ℃ 保存备用。2. 低熔点琼脂糖法:(1)在 UV 灯下,用手
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