多酚氧化酶(PPO)活性检测试剂盒(微量法);100T/48

多酚氧化酶(PPO)的纯化和活力测定

8.3)透析18h, 期间更换三次，即为纯化多酚氧化酶。 (3)多酚氧化酶(PP0)活力的测定 以儿茶酚为底物，在1cm的比色杯中加入2.75mL 0.025mol/L磷酸缓冲液中(pH7.2)， 0.1mL 0.15mol/L儿茶酚溶液，混匀，室温下放置3分钟后，加入0.1mL酶液, 5s后开始扫描1min内A420值的变化，酶活性以每分钟光吸收值改变0.001所需的酶量为1个活力单位。 五、注意事项 多酚氧化酶易失活，提取酶时宜在低温下进行。

PPO活性测定

值。在上述条件下，以A410读数，以每分钟增加0.01O.D.值定义为一个酶活性单位（U）。 二、仪器与试剂 （1）样品： 多酚氧化酶粗酶液 硫酸铵沉淀组分 DE-52洗脱组分 葡聚糖凝胶洗脱组分 （2）底物： 邻苯二酚：O.01M邻苯二酚溶液 （3）反应体系： 0.2M邻酸二氢钠－0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8 （4）器皿与仪器： 试管、恒温水浴等 分光光度计 三、酶蛋白的比活性 比活性＝酶活单位（U）/mg蛋白质 四、实验结果与分析

多酚氧化酶（PPO）的分离提取

一、原理与目的 多酚氧化酶是植物组织内广泛存在的一种含铜氧化酶，植物受到机械损伤和病菌侵染后，PPO催化酚与O2氧化形成醌，是组织形成褐变，以便损伤恢复，防止或减少感染，提高抗病能力。醌类物质对微生物有毒害作用，所以伤口醌类物质出现是植物防止伤口感染的愈伤反应，因而受伤组织一般这种酶的活性就会提高。多酚氧化酶也可与细胞内其他底物氧化相偶联，起到末端氧化酶的作用。 PPO的存在是水果、蔬菜褐变及营养丧失的主要原因之一。PPO氧化内源的酚类物质生成邻醌，邻醌再相互聚合成醌或蛋白质、氨