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- 源叶
- 中国
- R32873-2ml
- 2025年10月29日
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上海源叶生物科技有限公司
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2ml
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文献和实验【原创】实验方法分享：用某品牌rProtein A填料有效纯化小鼠腹水单抗
很多免疫教科书上描述，人和兔子，还有猪的抗体可以用proteinA亲和纯化。小鼠腹水单抗用protein G亲和介质进行纯化。 但是在实际科研中，我们发现用新的rProtein A也可以对小鼠腹水进行有效纯化 我和不少人说起过这个事，但是还是有很多怀疑和种种疑问 挑战经典理论确实是件难事 我摘抄了实验室一次实验与大家分享，希望对大家有所帮助 简单的实验步骤，适合没有层析仪，又希望快速得到抗体的实验室（此次纯化实验耗时约2小时）： 1，用binding buffer
：免疫亲和层析；SEC：排阻层析。 参考文献： 1. Hodges, R.S., et al. 1988. Antigen-antibody interaction. J Biol Chem 263: 11768-11775.2. Oprian, D.D., et al. 1987. Expression of a synthetic bovine rhodopsin gene in monkey kidney cells. Proc Natl Acad Sci USA 84: 8874
，我们设计了在IEC 过程中使用双梯度过程[30] 。在变性剂浓度梯度降低的同时，或者提高或者降低复性缓冲液中的pH 值，可以使含有二硫键的蛋白质的复性效率大大提高。在复性Fe-SOD 的过程中，双梯度离子交换层析方法显示了其优越性[31] 。 金属亲和层析(IMAC)是另外一种有效的纯化和复性蛋白质的层析方法。在高浓度变性剂存在的情况下，组氨酸尾仍旧具有吸附在金属亲和层析介质上的能力，所以可以在IMAC 上同时实现复性与纯化[32-35] 。如同Creighton 的IEC 过程，蛋白质吸附
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