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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RT
- 英文名:
Dialysis Membranes
- 库存:
99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- 规格:
5m
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文献和实验水至100ml;& q0 o: @; i6 S B液: 0.06M HAc:冰醋酸0.344ml,加蒸馏水至100ml;7 L) K* n4 q# C+ l( a 应用液:取A液59ml加B液41ml混合,用5M NaOH调PH值至4.8。 (4) 0.1M, PH7.4磷酸盐缓冲液(PBS)配制: 取Na2HPO4•12H2O 28.94克,KH2PO42.61克, 加蒸馏水至1000ml. (5) 含137mM NaCl,2.6mM KCl,0.2mM EDTA的PH磷酸
裂解细胞。其中超声波裂解细胞是更广泛应用的一种方法,但利用此方法细胞的裂解率较低,并且液不适用于大量细胞的裂解(超出 50 g)。无论选择何种方法,都必须将细胞置于冰上; 4) 细胞裂解后在混和液中迅速加入蛋白酶抑制剂,每 40 mL 混和液加入 5 mL 的含有 EDTA 的蛋白酶抑制剂 Cocktail Set II 或 1mL 的蛋白酶抑制剂 Cocktail Set III(选做); 5) 10000
的机理如下: 连接反应进行的条件: (1)Buffer体系。上述两个连接反应都应该在碱性环境下进行。pH宜在8-10之间,推荐使用Na2CO3-NaHCO3体系,pH尽量偏离蛋白的等电点,但不可高于10,否则填料很容易水解。pH也不能过低,否则抗原的氨基或巯基会被质子化,无法与beads结合。也可以考虑用其它的缓冲体系,但是绝对不可引入带有游离氨基或者巯基的化合物。为了防止蛋白类抗原的聚集,体系中还可以加入0.5M NaCl以提高盐离子浓度。 (2)蛋白质浓度
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