2-(4-羟基-3-甲基苯基)乙酸;29121-56-0;≥

正相硅胶/选择洗脱―气相色谱法、液相色谱―质谱法检测

公司);T�18basic均质器(德国IKA公司);低速离心机(德国Sigma公司);旋转蒸发仪(德国Heidolph公司);DC�12氮吹仪(上海安谱公司);标准品(德国DR公司);PSA粉末、LC�Si固相萃取小柱500 mg/6 mL(美国Supelco公司);所用试剂均为分析纯或色谱纯;实验用水为三重过滤去离子水。 　　2.2 实验方法 　　2.2.1 样品提取 (1)新鲜样品 称取匀浆样品2 g至50 mL离心管中，加入乙酸乙酯20 mL，无水Na2SO4 8 g，用均质

从猪脾中提取DNA

与二苯胺反应生成蓝色化合物，在595nm处有最大吸收。DNA在40-400μg范围内光密度与DNA浓度成正比。在反应液中加入少量乙醛可提高灵敏度，而且其他化合物的干扰也显著降低。当样品含少量RNA时不影响测定，而蛋白质、多种糖及其衍生物芳香，羟基醛都能与二苯胺形成各种有色物质，干扰测定。 1.二苯胺试剂：使用前称取0.8g二苯胺（需在70%乙醇试剂中重结晶2次)，溶于180ml冰乙酸中，再加入8ml过氯酸（60%以上），混匀待用，临用前加入0.8ml 1.6%乙醛溶液，所配试剂应为

核酸探针标记及原位杂交

液。此后操作在正常光线下进行。 （2）仲丁醇提取：加入100μl(等体积)仲丁醇(或正丁醇)，充分混匀，4000g离心2min。吸弃上相，加入等体积仲丁醇(或正丁醇)重复萃取一次。 （3）乙醇沉淀浓缩：吸弃上相，计量下相(溶液可浓缩至40μl左右)。加入1/10体积3mol/L的乙酸钠(pH5．2)和2倍体积冷无水乙醇，混匀。-20℃沉淀过夜或-70℃沉淀1h以上。以4℃10000g离心15min。弃上清，再用100μl 70％冷乙醇以4℃10000g离心15min。离心洗涤沉淀(注意勿将沉淀