MM41;1429028-96-5;10mM in DMSO

重组腺病毒构建、扩增及纯化

2.5×1010个细胞/ml）。分装，-80℃或液氮保存待用。 2、病毒骨架质粒转化大肠杆菌，扩增，纯化。 3、将1-5ul （约1ug） 线性化的穿梭质粒及1ul（约100ng/ul）病毒骨架质粒（如pAdEasy-1）加入至含约40ul BJ5183电转感受态的EP管中混匀，冰上冷却。 4、将混合物加入电转杯，电击（1250-1500V/mm,5ms）。 5、电击结束取出样品，加入1ml SOC或LB培养液，37℃低速振荡40min。 6、取适当体积的电击转化细胞液涂于数个卡那霉素抗性

RNA-biotin based pulldown assays for the detection of siRNA targeted genomic regions and siRNA directed histone modifications (PROT32)

H20 ChIP elution buffer       20ml final volume:       500µl 2M Tris       2ml 10% SDS       400µl 0.5M EDTA       17.1ml H2O cold lysis buffer       1mM PMSF       20units RNasin       10mM Tris-HCl pH 7.4       10mM NaCl       3mM MgCl2      

重组腺病毒构建，扩增及纯化基本技术操作

  将菌液转移至预冷的离心管中，4℃下以2500r/min离心15 min，弃培养液，回收细胞。 ²       以10ml预冷的10%甘油洗涤沉淀，低温离心，共两次。 ²       加约1ml（适量）预冷的10%甘油重悬沉淀，稀释悬液100倍，测量OD600 ， 至稀释浓度为2-3×1010 个细胞/ ml (1.0 OD600 约2.5×1010 个细胞/ml)。分装，-80℃或液氮保存待用。 2  病毒骨架质粒转化大肠杆菌，扩增，纯化。 3  将1-5µl