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SSX2基因敲除HEK293T细胞Trizol裂解液;K39013-500μl
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃
- 英文名:
pLenti-RNF26-sgRNA
- 库存:
99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- 规格:
500μl
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文献和实验℃冷冻柜。在制备RNA时,将储存于冷冻柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破细胞,不可以先行解冻,以避免RNase的作用。 1. 将组织在液N中磨成粉末后,再以50-100 mg组织加入1 ml Trizol液研磨,注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%;提取细胞RNA时,先离心沉淀细胞,每5-10×106个细胞加1 ml Trizol后,反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞; 2. 将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在室温15~30 ℃下放置5分钟
从原代构建到多组学验证,肾小管类器官慢病毒工程化标准操作Protocol!
、5%CO₂培养箱中静置约20分钟使液滴凝固。 7.加入预热完全培养基(24孔板500μL/孔、12孔板1mL/孔、6孔板2.5mL/孔),镜下观察类器官状态。 8.37℃、5%CO₂培养箱中培养,每3-4天换液。 肾小管类器官慢病毒转导 本部分介绍HEK293T细胞制备慢病毒颗粒,以及旋转感染法转导肾小管类器官的操作。 1.接种HEK293T细胞(转染第1天) a.吸弃15cm培养皿中HEK293T细胞的培养基。 b.沿皿壁轻轻加入10mLDPBS,轻柔晃动洗涤贴壁细胞。 c
;2. 将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在室温15~30C下放置5分钟;3. 在上述EP管中,按照每1ml TRIZOL加0.2ml氯仿的量加入氯仿,盖上EP管盖子,在手中用力震荡15秒,在室温下(15℃~30℃)放置2~3分钟后,12000g(2℃~8℃)离心15分钟;4. 取上层水相置于新EP管中,按照每1ml TRIZOL加0.5ml异丙醇的量加入异丙醇,在室温下(15℃~30℃)放置10分钟,12000g(2℃~8℃)离心10分钟;5. 弃上清,按照每1ml TRIZOL加
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