HIST1H4G基因敲除HEK293T细胞RIPA裂解液;K

交联染色质免疫共沉淀（X-ChIP）实验设计

离心5分钟1.6.将上清倒去，使用FA裂解液将沉淀重悬浮（1x107cells/750μl).初始细胞要有1*107-5*107个，采用终浓度为0.75%甲醛和如上描述的甘氨酸处理。预冷PBS洗3次，1，000g离心5分钟，沉淀用FA裂解液重悬浮。2 超声破碎超声裂解细胞悬液可以将DNA均一的打断成500-1000bp的片段。不同的细胞系需要不同的超声时间才能达到最优效果。交联细胞要通过时间梯度的超声来选择最优超声条件。样品通过时间梯度，DNA的分离如部分3所描述。片段大小序在1.5%的琼脂

Caspase活性检测系列（分光光度法）检测原理及操作指南

酶活性检测： A、取Ac-特异性多肽-pNA和2 ×反应液，溶解后冰浴备用。 B、 2 ×反应液工作液制备：每50 μL 2 ×反应液加入0.5 μL DTT。 C、吸取45 μL含100-200 μg蛋白的细胞或者组织裂解上清，如体积不足45 μL则用裂解液工作液补足至45 μL（各组采用相同的蛋白含量和体系进行测定和比较）。 D、按照下表设置反应体系： 注意： 1） 在设置反应体系时先加入反应工作液，再加入待测样本后适当混匀，注意避免产生气泡。 2） 最后加入Ac-特异性多肽-pNA

请教RIPA的配制

to another tube and stored in aliquost...... （2）细胞溶于ＲＩＰＡ缓冲液(1×ＰＢＳ,体积分数为1%ＮＰ-40,5ｇ/Ｌ脱氧胆酸钠,1ｇ/ＬＳＤＳ,1ｍｍｏｌ/ＬＰＭＳＦ,10μｇ/ｍｌ抑肽酶,10μｇ/ｍｌ抑酶醛肽)20分钟(0℃),离心上清获蛋白。Ｂｉｏ Ｒａｄ试剂盒进行蛋白质定量。 （3）培养皿中加入1ml预冷的RIPA裂解缓冲液(Tris-HCl 50mmol/L pH8.0；NaCl 150mmol/L；DTT 1mmol/L；EDTA 0.5mmol/L；NP