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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃
- 英文名:
pLenti-H4C3-sgRNA
- 库存:
99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- 规格:
500μl
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文献和实验℃冷冻柜。在制备RNA时,将储存于冷冻柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破细胞,不可以先行解冻,以避免RNase的作用。 1. 将组织在液N中磨成粉末后,再以50-100 mg组织加入1 ml Trizol液研磨,注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%;提取细胞RNA时,先离心沉淀细胞,每5-10×106个细胞加1 ml Trizol后,反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞; 2. 将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在室温15~30 ℃下放置5分钟
收集上清,注意避免吸入菌体或菌体碎片; 2)3000 g,4°C,再次离心 15 min,确保将菌体及菌体碎片去除干净; 3)取上清,注意避免吸入菌体及菌体碎片,合并相同的菌液上清样品,装入无菌容器,可在 4°C 短期保存(1-2 天),长期保存可冻存于-80°C。建议菌液上清分离后尽快进行外泌体分离,保存会对产量有一定的影响。 10、外泌体 1)收集细胞上清或其他样本抽提外泌体后,用 100 μL-500 μL PBS 重悬沉淀; 2)放入-80℃ 冰箱中保存。 3)填写样本登记单,记录样本
;2. 将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在室温15~30C下放置5分钟;3. 在上述EP管中,按照每1ml TRIZOL加0.2ml氯仿的量加入氯仿,盖上EP管盖子,在手中用力震荡15秒,在室温下(15℃~30℃)放置2~3分钟后,12000g(2℃~8℃)离心15分钟;4. 取上层水相置于新EP管中,按照每1ml TRIZOL加0.5ml异丙醇的量加入异丙醇,在室温下(15℃~30℃)放置10分钟,12000g(2℃~8℃)离心10分钟;5. 弃上清,按照每1ml TRIZOL加
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