- ￥1887.90
- 源叶
- 中国
- K35271-500μl
- 2025年10月29日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-80℃
- 英文名：
pLenti-H4C2-sgRNA
- 库存：
99
- 供应商：
上海源叶生物科技有限公司
- 规格：
500μl
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文献和实验℃冷冻柜。在制备RNA时，将储存于冷冻柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破细胞，不可以先行解冻，以避免RNase的作用。 1. 将组织在液N中磨成粉末后，再以50-100 mg组织加入1 ml Trizol液研磨，注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%；提取细胞RNA时，先离心沉淀细胞，每5-10×106个细胞加1 ml Trizol后，反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞； 2. 将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在室温15~30 ℃下放置5分钟
；2. 将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在室温15~30C下放置5分钟；3. 在上述EP管中，按照每1ml TRIZOL加0.2ml氯仿的量加入氯仿，盖上EP管盖子，在手中用力震荡15秒，在室温下（15℃～30℃）放置2～3分钟后，12000g（2℃～8℃）离心15分钟；4. 取上层水相置于新EP管中,按照每1ml TRIZOL加0.5ml异丙醇的量加入异丙醇，在室温下（15℃～30℃）放置10分钟,12000g（2℃～8℃）离心10分钟；5. 弃上清，按照每1ml TRIZOL加
③ 4℃、12000r/min离心15min，上层水相，+等体积的异丙醇，混匀，4℃静置10min ④ 4℃、12000r/min离心10min，弃上清，沉淀经20ml 75%乙醇洗涤2次，晾干，500μL DEPC水溶解RNA 改良： a. 加入氯仿前添加5M NaCl高盐溶液4ml，摇匀 b. 在沉淀RNA之前加入等体积的酚：氯仿：异戊醇(25:24:1)，混匀，RT 5min，4℃、12000r/min离心
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