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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃
- 英文名:
pLenti-H2BC8-sgRNA
- 库存:
99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- 规格:
500μl
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文献和实验样本 1) 取50 mg组织置于培养皿中,手术剪剪碎,加入200 μL预冷的裂解液工作液,冰上用玻璃匀浆器匀浆 (组织量加倍时,加入的预冷裂解液也加倍)。 2) 将匀浆好的样本转移到1.5 mL的离心管中,冰浴放置5 min裂解。 3.12,000 rpm在4°C下离心10-15 min。 4.小心地吸取上清转移至新的EP管中,并置于冰上待用。 5.立即测定Caspase的酶活性或者-70°C保存样本,亦可取少量样本用Bradford法[E-BC-K168,详询当地经销商]测定蛋白浓度。 6.Caspase
:1, v/v)(6)DEPC-H2O 饱和酚:将 DEPC-H2O 和酚 1:1 混合,室温摇晃 1 小时,然后静止使其分层,吸除水相,再加入 DEPC-H2O 重复一次,此即 DEPC-H2O 饱和酚。(7)无水乙醇(8)75% 冰冷乙醇【实验方法与步骤】(1)取离心洗涤后的 1×106 培养细胞或相当量的研磨后的组织,加入 200? 滋 l GuSCN/25 mM)-巯基乙醇溶液,剧烈震荡使细胞裂解,此时溶液变黏稠;(2)加入下列成分:2M NaAc (pH4.0) 25? 滋 l,DEPC-H2
;2. 将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在室温15~30C下放置5分钟;3. 在上述EP管中,按照每1ml TRIZOL加0.2ml氯仿的量加入氯仿,盖上EP管盖子,在手中用力震荡15秒,在室温下(15℃~30℃)放置2~3分钟后,12000g(2℃~8℃)离心15分钟;4. 取上层水相置于新EP管中,按照每1ml TRIZOL加0.5ml异丙醇的量加入异丙醇,在室温下(15℃~30℃)放置10分钟,12000g(2℃~8℃)离心10分钟;5. 弃上清,按照每1ml TRIZOL加
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