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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 英文名:
GPR15L
- 库存:
99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- 规格:
500μg
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文献和实验- - - - 1× HEPES - - - - 15mM Activin A 100ng/ml 100ng/ml 100ng/ml 100ng/ml - C687 FGF-4 - - - 500ng/ml - CR08 Wnt3a - - - 500ng/ml - C06D/C18K Noggin - - - - 100ng/ml CB89
,直到全部溶解,用 HCl 调节 PH 值到 7.4; 2.加 10 ml 10% 的 NP-40; 3.加 2.5 ml 10% 的去氧胆酸钠,搅拌,直到溶液澄清; 4.加 1 ml 100 mM 的 EDTA,用量筒定容到 100 ml,2~8 ℃ 保存; 5.理论上,蛋白酶和磷酸酯酶抑制剂应该在使用当天同时加入(抑蛋白酶肽,亮抑酶肽, 胃蛋白酶抑制剂各 100 μl;PMSF,Na3VO4,NaF 各 500 μl),但是 PMSF 在水溶液中很不稳定,30 分钟就会降解一半,所以 PMSF 应该
内的,而酶只有在甘油浓度 具体操作如下:在 1.5 mL 离心管中依次加入DNA(1 μg/μl)20 μg10× 酶切 buffer 4.0 μl限制性内切酶(10 U/μl)5.0 μl加 ddH2O 至 500 μl在最适温度下消化 1-3 hr。消化结束时可取 5 μl 电泳检测消化效果。如果消化效果不好,可以延长消化时间,但超过 6 hr 已没有必要。或者放大反应体积,或者补充酶再消化。如仍不能奏效,可能的原因是 DNA 样品中有太多的杂质,或酶的活力下降。消化后的 DNA 加入 1/10
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