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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃(运输条件:冰袋低温运输)
- 英文名:
Curdione
- 库存:
99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- CAS号:
13657-68-6
- 规格:
1ml
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文献和实验图2 APC 5'末端的扩增。用对应APC mRNA的位置5846的GSP反转录1mg Hela总RNA得到APC mRNA。cDNA被纯化、加尾,和用对应位置1797(A带)和位置1632(B带)的引物和AAP一起,用ELONGASE酶混合物来扩增(94℃ 30s,接着35个循环的94℃ 15 s,55℃ 30 s,68℃ 5 min)。初步PCR用TE缓冲液稀释100倍,取1ml用引物APC-1632(A带)或引物APC-1242(B带)和AUAP分别重新扩增(30个循环),每个PCR
2.7.1PCR 鉴定体系 10X Taq buffer 3 ul 4X dNTP (10mM) 0.5 ul Taq DNA polymerase(5U/ul) 0.2ul(1U) 10uM引物 (双向) 各1ul 50%DMSO(which is optional) 1ul 模板:过夜菌液 / 挑单克隆 2ul 加灭菌水至 30ul 2.7.2 PCR 鉴定程序: 94℃ 5min 94℃ 30s 30cycle 55℃ 30s 72℃ 3min 72℃
链的合成,然后马上进行第二链的合成。二、cDNA第二链的合成1、在已经合成好cDNA第一链的离心管中加入每管如下反应物,16℃反应2hr:sterile H2O 48.4ul5×Second-strand Buffer 16.0uldNTPs Mix(10mM)1.6ul20×Second-strand Enzyme Cocktail 4.0ul2、加入2ul(6U)T4 DNA Polymerase,16℃反应30min。3、加入20×EDTA/Glycogen Mix 4ul,以终止反应。4、加入
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