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上海源叶生物科技有限公司
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500ml
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文献和实验.0。(2) 10×磷酸盐-NaCl 缓冲液(PBS):100mmol/L PBS,pH7.4。称NaCl 80g、Na2HPO412H2O 29g、KCl 2g、KH2PO4 2g,加蒸馏水溶解,加入100mmol/L EDTA 20ml,用去离子水定容至l000ml。(3) 透析液 10mmol/L Na2HPO4-KH2PO4缓冲液,含15mmol/L NaCl,pH7.2。(4) 硫酸铵。(5) 辛酸。四、操作步骤 1、抗血清用4倍体积乙酸-乙酸钠缓冲液稀释,用0.1mol/L NaOH调至血清
剂,以供读者选用。1、4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.3)多聚甲醛 40g0.1mol/L磷酸缓冲液至1000ml配制方法:称取40g多聚甲醛,置于三角烧瓶中,加入500~800ml 0.1mol/L磷酸缓冲液(Phosphate Buffer以下简称PB),加热至60℃左右,持续搅拌(或磁力搅拌)使粉末完全溶解,通常需滴加少许1N NaOH才能使溶液清亮,最后补足0.1mol/L的PB于1000ml,充分混匀。该固定剂较适于光镜免疫细胞化学研究,最好是动物经灌注固定取材后,继续
胺,盐酸调pH至8.0)的烧瓶内,室温孵育2h或者4℃过夜。8.在烧结漏斗中依次用100ml偶联缓冲液100乙酸盐缓冲液(0.1mol/L乙酸钠,0.5mol/L氯化钠,pH4.0)洗偶联介质一次,重复此步骤四次。9.如果不准备立即使用偶联介质,影使用含0.02%叠氮钠的偶联缓冲液再洗一次。装柱1.选柱:不宜过大,一般以1.5×15cm的层析柱可装偶联蛋白的琼脂糖约30ml。2.装柱:将已与蛋白偶联的琼脂糖装入层析柱内,拧紧下口夹,让其下沉,数分钟后松开下口夹,使溶液约以1ml/min的速度流出
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