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- 文献和实验
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RT
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99
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上海源叶生物科技有限公司
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500ml
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文献和实验平板状,电泳缓冲液覆盖在平板表面,加样后,通电进行电泳,故称为潜水式电泳。【实验试剂与器材】1. 5×TBE: 54 g Tris 碱,27.5 g 硼酸,20 mL 0.5mol/L EDTA(pH 8.0),配 1 升。2. 0.5xTBE: 取 5×TBE 作 10 倍稀释3. 溴化乙啶液: 10 mg/mL 水4. 6×载样缓冲液: 0.25% 溴酚蓝,40%(W/V) 蔗糖水溶液【实验方法与步骤】1. 铸胶 1 g 琼脂糖加 0.5xTBE 缓冲液 100 mL,在微波炉上加热融化,冷却至放在
使用 3~5 次。 转移缓冲液 1X 电转液: 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 溶解后 4 ℃ 保存,1 次溶液可重复使用 3~5 次。 TBS 缓冲液 加蒸馏水溶解,冰醋酸调 pH 至 7.2,定容至 1000 mL。室温保存。 洗脱液 TBST 溶液 TBS 溶液 1000 mL ,1 mL 吐温 20,混匀后即可使用,最好现用现配。 封闭液(含 5% 脱脂奶粉的 TBST 缓冲液) 溶解后使用,一次性使用。 RIPA(中)裂解液 Tris-base、NaCl、EDTA、SDS
液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS, 3M NaAc 方法二: 1. 真菌菌丝 0.5-1 g, 在液氮中迅速研磨成粉 2. 加入 3 mL 65℃ 预热的 DNA 提取缓冲液,快速振荡混匀 65℃ 水浴 30 min, 期间混匀 2-3 次 3.加入 1 mL 5M KAc,冰浴 20 min 4.等体积的氯仿: 异戊醇 (24:1) 抽提 1 次(10,000 rpm
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