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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃
- 库存:
99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- 规格:
500ml
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文献和实验稀释液为pH4.5。 2、室温下边搅拌(磁力搅拌器或电功搅拌器),边缓慢滴加辛酸(25ml/L血清稀释液),滴加完后继续搅拌30min。 3、离心(10000r/min,30min),收集上清夜,弃去沉淀。 4、上清液用多层纱布过滤。 5、按1/10体积加入10×PBS,用5mol/L NaOH调至PH7.4。 6、上清液4℃预冷,计算溶液总体积,在4℃按277g/L加入硫酸铵粉沫(45%饱和度),边加边搅拌,加完后继续搅拌30min。 7、离心(5000r/min,15min)),弃去上清
液,上下颠倒充分混合,7500×g,4 ℃,离心 5 min,回收上层水相;5. 加入 1/10 倍体积的 65 ℃ 预热 CTAB/NaCl 溶液,上下颠倒混匀;6. 用等体积的氯仿/异戊醇抽提,混匀,离心,回收上层水相;7. 加入 1 倍体积的 CTAB 沉淀液,上下颠倒混匀,如果沉淀可见,继续做步骤 8,也可于 65 ℃ 温育 30 min;8. 500×g,4 ℃,(或约 2700 rpm) 离心 5 min;9. 移出上清,用高盐 TE 缓冲液重悬沉淀 (按每克起始材料加 0.5~1 mL
。 浓缩胶缓冲液:Tris-Base 30.25 g,20% SDS 10 ml,加三蒸水60 ml,饱和盐酸调pH 至6.8,定容至500 ml,4℃备用。 分离胶缓冲液:Tris-Base 90.5 g,20% SDS 10 ml,加三蒸水约60 ml,饱和盐酸调pH至8.8,定容至500 ml,4℃备用。 10×电泳缓冲液:29gTris-Base,144g Glycine,10 g SDS加500 ml三蒸水溶解,震荡混匀后,定容至1000 ml,4?C 备用,用时稀释至1倍
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