5×蛋白上样缓冲液（含DTT）;R32082-10ml

免疫共沉淀实验指南

-PAGE 电泳分析检测结果。这种方法得到的目的蛋白 N是在细胞内与蛋白 M 天然结合的，符合体内实际情况，得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。 步骤 用预冷的 PBS 溶液洗涤贴壁细胞两次（对于悬浮细胞则用台式离心机以 800-1000 rpm 转速通过离心洗涤）。 加入预冷的 RIPA 液（含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂），RIPA 液的用量：按照 0.5 mL 每 5×106 细胞计算。 注：悬浮细胞，收集

三氯乙酸-丙酮法提取植物全蛋白

电解质移动形成。20 世纪 90 年代开始出现的商品化的 IPG 胶条用于等电聚焦电泳，大大提高了电泳的重复性，因而被广泛使用。 然而，使 用 IPG 胶条进行等电聚焦时，需要施加很高的电压，而 UKS 溶液中的高含盐量和 SDS 使得该缓冲液不适合这种等电聚焦系统 [6]，因而必须采用新的样品缓冲液。 本章，我们将着重描述分别为进行传统的等电聚焦和现代的 IPG 等电聚焦电泳制备样品所采用的不同步骤。2. 材料 2.1 蛋白沉淀溶液 含 10%  (m/V） 三氯

【资源】电泳相关溶液配制==2D 双向凝胶电泳

1、 水化上样缓冲液（ I ） : 尿素 8M 4.805g CHAPS 4% 0.4g DTT 65mM 0.098g （现加） Bio-Lyte 0.2%(w/v) 50 m l （ 40% ）（现加） 溴酚蓝 0.001% 10 m l （ 1% 溴酚蓝） MilliQ 水 定容至 10ml 分装成 10 小管，每小管 1ml ， -20 ℃冰箱保存。 2、水化上样缓冲液（ II ）: 尿素 7M 4.2g 硫脲 2M 1.52g CHAPS 4% 0.4g