PBS磷酸盐缓冲液;0.1mol/L，PH4.7;R2742

辛酸-硫酸铵法从人血清中纯化IgG

稀释液为pH4.5。 2、室温下边搅拌（磁力搅拌器或电功搅拌器），边缓慢滴加辛酸（25ml/L血清稀释液），滴加完后继续搅拌30min。 3、离心（10000r/min，30min），收集上清夜，弃去沉淀。 4、上清液用多层纱布过滤。 5、按1/10体积加入10×PBS，用5mol/L NaOH调至PH7.4。 6、上清液4℃预冷，计算溶液总体积，在4℃按277g/L加入硫酸铵粉沫（45%饱和度），边加边搅拌，加完后继续搅拌30min。 7、离心（5000r/min，15min)），弃去上清

免疫细胞化学常用试剂

.8g，加蒸馏水至1000ml，使0.2mol/L的二甲胂酸钠溶液；再取HCl 1.7ml加蒸馏水至1000ml ，配成0.1N，最后 取0.2mol/L二甲胂酸钠溶液500ml及0.1n HCl 28ml混合，加蒸馏水至1000ml，即为0.1mol/L的二甲胂酸钠缓冲液。 8、几种常用的不同pH值缓冲液的配制表 （1）0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7~8.0） （2）0.05mol/L Tris-HCl缓冲液（pH7.19~9.10） （3）0.2mol/L醋酸盐缓冲

【专题讨论】新手做WB的几张片子，请各位高人指点。

：蛋白质样本和生物素标记的蛋白marker标准经SDS-PAGE后转于印迹膜上，然后经一抗→HRP 标记的二抗→HRP催化LumiGLO试剂发生反应并产生荧光→显影于X-光片上。其基本原理如下图： 3.1 主要试剂配制 10×转移缓冲液(transfer buffer)：30.3 gTris-Base，144.1 g Glycine，500 ml三蒸水，振荡混匀后，定容至1000 ml，4℃备用。用时用0.1 M磷酸缓冲液即1×PBS和甲醇稀释至1倍，使甲醇的终浓度