多酚氧化酶(PPO)活性检测试剂盒(可见分光光度法);50T

PPO活性测定

值。在上述条件下，以A410读数，以每分钟增加0.01O.D.值定义为一个酶活性单位（U）。 二、仪器与试剂 （1）样品： 多酚氧化酶粗酶液 硫酸铵沉淀组分 DE-52洗脱组分 葡聚糖凝胶洗脱组分 （2）底物： 邻苯二酚：O.01M邻苯二酚溶液 （3）反应体系： 0.2M邻酸二氢钠－0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8 （4）器皿与仪器： 试管、恒温水浴等 分光光度计 三、酶蛋白的比活性 比活性＝酶活单位（U）/mg蛋白质 四、实验结果与分析

多酚氧化酶(PPO)的纯化和活力测定

液( pH7.2);0.15mol/L儿茶酚溶液;10mmol/LTris-HCl溶 液(pH8.3);硫酸铵。 二、材料 梨 三、器材 组织匀浆机，漏斗，滤纸，分光光度计 。 四、操作方法 (1)多酚氧化酶(PP0)的提取 1. 丙酮粉制备：取果肉组织100 g，加入200mL冰丙酮(—20℃左右)，用高速组织捣碎机匀浆5min，混合液用中速滤纸在漏斗架上过滤，残渣用冰丙酮反复冲洗，过滤，直至成为白色

多酚氧化酶（PPO）的分离提取

一、原理与目的 多酚氧化酶是植物组织内广泛存在的一种含铜氧化酶，植物受到机械损伤和病菌侵染后，PPO催化酚与O2氧化形成醌，是组织形成褐变，以便损伤恢复，防止或减少感染，提高抗病能力。醌类物质对微生物有毒害作用，所以伤口醌类物质出现是植物防止伤口感染的愈伤反应，因而受伤组织一般这种酶的活性就会提高。多酚氧化酶也可与细胞内其他底物氧化相偶联，起到末端氧化酶的作用。 PPO的存在是水果、蔬菜褐变及营养丧失的主要原因之一。PPO氧化内源的酚类物质生成邻醌，邻醌再相互聚合成醌或蛋白质、氨