羊抗人白蛋白（免疫血清）;SSA107-0.5ml

SILEC: a protocol for generating and using isotopically labeled coenzyme A mass spectrometry standards

, trypsinize and split 1:5 into SILEC expansion medium. For S2 (suspension) cells, when cells have reached ~1 × 107   cells per ml, split into a new flask containing SILEC expansion medium at a concentration of 2 × 106   cells. (3) Repeat Step

抗体的轻、重链嵌合基因共转染受体细胞

的PBS(pH7.3)重悬细胞，取1滴悬液显微镜下计数，取1´107 细胞。 （2）质粒DNA的酶切消化：为使质粒DNA线性化，以利于电转染，可使用PvuⅠ分别酶切消化VH、VL重组质粒。因为表达载体上只有PvuⅠ的单一酶切位电。      （3）电转染：取１ml冰预冷的PBS（pH7.3）+Hepes(100mmol/L)重悬细胞(1´107 细胞/ml)，取700ml，加入预冷的电转染样品杯中；用100ml冰预冷的PBS（pH7.3）+Hepes(100mmol/L) 重悬上述制备

磁化细胞分离器分离法（MACS）分离NK细胞

核细胞的浓度用含10%血清RPMI-1640调整为4×106 /ml，加入到无菌的塑料平皿中，37℃，7.5%CO2 环境中培养2h后，除去粘附于塑料的单核细胞和B细胞； 3. 非粘附细胞与含10%血清RPMI-1640液预孵育1h后过尼龙棉柱，B细胞和剩余的单核细胞粘附在尼龙棉柱上，用培养液洗柱，收集洗下的T细胞和NK细胞； 4. 用磁场分离T细胞和NK细胞：以无菌操作标记和分离细胞。新分离的T细胞和NK细胞在水浴中进行标记，细胞先与抗表面抗原的单抗孵育10min（107 个细胞用100ul抗CD3