蔗糖合成酶（合成方向；SS-Ⅱ）活性检测试剂盒(分光光度法)

缺口平移法探针标记

平移法(nick translation)是一种最常用的标记双链DNA探针的方法，该方法利用DNA聚合酶I的多种酶促活性将标记的三磷酸脱氧核糖核苷(dNTP)掺入到新合成的DNA链中，从而合成高比活性的均匀标记的DNA探针。其基本原理是首先用适当浓度的DNA酶I在DNA探针分子的一条链上打开缺口(nick)，缺口处形成3，羟基末端；利用大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ 5， →3， 方向外切酶活性，将缺口处5， 端核苷酸依次切除；与此同时，在大肠杆菌DNA聚合酶I的5， →3， 聚合酶活性的催化

这几类 PCR 技术你知道吗？

Taq DNA 聚合酶活性的常用方法是在冰上配制 PCR 反应液，并将其置于预热的 PCR 仪。这种方法简单便宜，但并不能完成抑制酶的活性，因此并不能完全消除非特异性产物的扩增。 热启动通过抑制一种基本成分延迟 DNA 合成，直到 PCR 仪达到变性温度。包括延缓加入Taq DNA 聚合酶在内的大部分手工热启动方法十分烦琐，尤其是对高通量应用。其他的热启动方法使用蜡防护层将一种基本成分，如镁离子或酶，包裹起来，或者将反应成分，如模板和缓冲液，物理地隔离开。在热循环时，因蜡熔化而把各种成分释放

核酸分子杂交法

。DNA探针（包括cDNA探针）有三大优点：第一，这类探针多克隆在质粒载体中，可以无限繁殖，取之不尽，制备方法简便。其次，DNA探针不易降解（相对RNA而言），一般能有效抑制DNA酶活性。第三，DNA探针的标记方法较成熟，有多种方法可供选择，如缺口平移法、随机引物法、PCR标记法等，能用于同位素和非同位素标记。（二）cDNA探针 cDNA是指互补于mRNA的DNA分子（complementary DNA）。cDNA是由RNA经一种称为逆转录酶的DNA聚合酶催化产生的。携带逆转录酶的病毒侵入宿主