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RT
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见标签
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999
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鹿森生物
- 规格:
100MG

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文献和实验将其稀释至 1 mg/mL 以降低缓冲体系中去污剂的浓度(但对于那些在细胞中表达水平较低的蛋白而言,10 mg/mL 这样更高的浓度可能对免疫沉淀更有效一些)。 加入推荐体积的免疫沉淀抗体至 500 µL 细胞裂解液中与目标蛋白反应。(抗体的最适用量要根据每一细胞模型中免疫沉淀靶蛋白的数量来确定)。 将细胞裂解液与抗体轻轻混匀后孵育 2h,或 4℃ 缓慢振荡过夜。(选择孵育 2h 常用于免疫沉淀与激酶或磷酸酯酶作用的活化酶。)加入100 µL Agarose protein A+G 轻轻振荡 1h
Deglycosylation of Glycoproteins Using Endoglycosidases
(CHO)-N-S-D-I-S-S-T-R IGM, biantennary with core 1-6 fucose, Sodium acetate 100 mM pH 4.5 Protocol: 1. Heat denature transferrin by incubation of 1 mg/ml of the glycoprotein in 0.5% SDS for 3 min. at 90°C.
或者 Mowiol 封片。 氨乙基咔唑 氨乙基咔唑(AEC)产生红色产物,其敏感性低于 DAB,但可用于 DAB 反应产生较高背景或要求改变产物颜色的实验。此产物可溶于醇,但不溶于水。 1. 需要的溶液和特殊设备 0.4% AEC用 N,N —二甲基甲酰胺(DMF)溶解, 0.1 mol/L 乙酸钠缓冲液(pH5.2),过氧化氢, Gelvatol 或 Mowiol,光学显微镜(通常带有照相机以便于记录结果)。 2. 操作步骤 (1) 用 l mL DMF 溶解 4 mg AEC。AEC
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