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999
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联硕生物
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100G

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文献和实验延伸(Kuppuswamy等1991年提出[29])的Ms-SnuPE方法[30],用于定量检测已知序列中特异位点的甲基化水平。过程是:先将研究序列用重亚硫酸盐处理,未甲基化的胞嘧啶全部转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变。进行PCR扩增,然后取等量扩增产物置于2管中,分别作为Ms-SnuPE单核苷酸引物延伸的模板。设计用于Ms-SnuPE延伸的引物的3’端紧邻待测碱基。同时于2个反应体系中加入等量的Taq酶、引物、同位素标记的dCTP或dTTP。这样,如果待测位点被甲基化,则同位素标记的dCTP会在反应延伸时连于引物
]。 MSO要求预先设计一对含有2个不相邻的GC(或AC)的探针,用于识别甲基化和非甲基化的序列,其中含GC的探针(5[42]'---GC---GC---3')识别甲基化序列,含AC的探针(5'---AC---AC---3')识别非甲基化序列,探针的5'端通过Linker固定于玻璃板上。首先对待研究片段用重亚硫酸盐处理,将非甲基化的胞嘧啶变为尿嘧啶,甲基化的不变,再行PCR扩增,产物的3'端用荧光素标记,移至连有探针的玻璃板上进行杂交,通过检测杂交后产生的荧光强度判断待测序列中甲基化的水平。此方法一定
5weeks6weeks7weeks8weeks9weeks10weeksFemale 14.30 +/-1.5217.56 +/-1.4218.47 +/-1.0518.27 +/-1.1018.95 +/-1.0320.16 +/-1.4720.23 +/-1.20Male17.02 +/-2.0719.29 +/-1.4622.78 +/-1.6723.62 +/-1.4225.19 +/-1.5927.02 +/-2.0226.89 +/-1.493)解剖学特性:脏器重量及脏器重量系数表脏 器
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