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999
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联硕生物
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100MG

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文献和实验免疫金银染色(immuno gold silver staining,IGSS)
IGSS的主要 试剂 为银染液。以往一般用硝酸银染液,但其对光的稳定性较差;改用乙酸银溶液后稳定性加强,配方如下: A液:0.22%乙酸银溶液(乙酸银110mg溶于去离子水50ml中)。 B液:50%阿拉伯树胶溶液(阿拉伯树胶50g溶于去离子水100ml中,每天振摇3次,5天后过滤使用)。 C液:1%对苯二酚溶液(对苯二酚500mg溶于0.55mol/LpH3.8的柠檬酸盐缓冲液50ml中)。 D液:在C液中加入B液
或者 Mowiol 封片。 氨乙基咔唑 氨乙基咔唑(AEC)产生红色产物,其敏感性低于 DAB,但可用于 DAB 反应产生较高背景或要求改变产物颜色的实验。此产物可溶于醇,但不溶于水。 1. 需要的溶液和特殊设备 0.4% AEC用 N,N —二甲基甲酰胺(DMF)溶解, 0.1 mol/L 乙酸钠缓冲液(pH5.2),过氧化氢, Gelvatol 或 Mowiol,光学显微镜(通常带有照相机以便于记录结果)。 2. 操作步骤 (1) 用 l mL DMF 溶解 4 mg AEC。AEC
大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶E292对于氨基酰化活性的作用
得到:1 A280 =1.62 mg/ml。 4. 酶活力测定 1) 氨基酸活化反应的条件如下:35ul反应液中含有100 mM HEPES (pH 7.8),10mM KF,10 mM MgCl2 ,4 mM ATP,2 mM [32 P] PPi和1 mM亮氨酸,在37o C保温,用约4 nmol/L LeuRS起始反应,于不同时间,取出15ul反应液,加入200ul淬灭液中(3.5%高氯酸,2%活性炭和0.05 M焦磷酸钠)停止反应,在淬灭液中再加入5毫升10 mM焦
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