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- AMEKO
- 中国
- AS90075-100T
- 2025年09月13日
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常温
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见标签
- 英文名：
CCK-8
- 库存：
现货
- 供应商：
联硕生物
- CAS号：
无
- 规格：
100T
1、在96孔板中接种细胞悬液(100ul/孔)，通常细胞增殖实验每孔约2000个细胞，细胞毒性实验每孔约5000个细胞，具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素决定)。
2、按照实验需要，进行培养并给予0-10ul特定的药物刺激，处理一段适当的时间(例如:6,12,24或48小时)。
3、每孔加入10ul CCK-8溶液。如果起始的培养体积为200ul，则需加入20ulCCK-8溶液，以此类推。可以用加相应量细胞培养基和CCK-8但不加细胞的孔作为空白对照，若担心所使用的药物会干扰检测，需设置加相应量细胞培养液、药物和CCK-8溶液但不加细胞的孔作为空白对照。
4、在细胞培养箱内继续孵育1-4小时，具体时间可以通过预实验确定。预实验时可以在0.5、1、2和4小时后分别用酶标仪检测，然后选取吸光度范围比较适宜的一个时间点用于后续实验。
5、用酶标仪测定在450nm处的吸光值，若无450nm滤光片，可以使用420-480nm的滤光片。如果样品为高浑浊度的细胞悬液，可以使用大于600nm的波长，例如650nm，作为参考波长进行双波长测定。
6、如果需要暂时不测定O.D值，可以向每孔中加入10ul 0.1MHCl溶液或者1%w/v的SDS溶液，避光保存在室温，24小时内吸光度不会发生变化。
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文献和实验一、实验原理 细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。 其基本原理为：该试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】，在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8法
在细胞培养实验过程中，大家是不是总会好奇别人家的实验总是做的又快又好，而自己做的实验又慢又难得做出自己满意的结果，搞得一天到晚也挺忙的，心想：我也很努力很认真啊，为啥效率总提不起来呢？其实，有时候并不是自己不努力，只是没有找对方法。做实验可不能光是埋头苦干，还要学会运用合适的检测试剂盒，这样就能事半功倍。如果你还在用 MTT，那就真的 OUT 了，MTT 花 4 小时才能得到的结果用 CCK-8 只需 1 小时，CCK-8 可用于细胞增殖和毒性分析，同 MTT 法相比，CCK-8 即开即用
在生物江湖过了这么多年，懂行的人都知道检测细胞活性、凋亡、毒性方面有着各式各样的试剂和方法。而大都有预见性地肯定道CCK-8法是目前最具潜力和优势的细胞活性毒性检测方法。那为什么较早期传统的MTT法，CCK-8法会此被科研和药厂等相关实验人员看好呢？今天就这个方面来和大家做个交流，给点鄙人的见解。 不可否认，曾经MTT法的出现使各实验人员为之振奋。因为MTT法较当时其他细胞活性检测有不需要特殊检测仪器、无放射性同位素、适合大批量检测等优势，随即MTT势不可挡地成为细胞活性检测的主流方法。需知
