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RT
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见标签
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999
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联硕生物
- 规格:
500MG

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文献和实验。 11. 准备杂交探针:将比活性为 108 cmp/ μ g 的切口平移探针 0.25 μ g 加到 1 个带螺纹帽的 50ml 试管中,加 0.5ml 2mg/ml 的鲑鱼精子 DNA 溶液,再依次加入下列溶液并振荡混合使其变形: 10M NaOH 50 μ l; 2M Tris pH7.4 300 μ l; 1M HCl (延壁加) 500 μ l 。 12. 将此变性的探针加到放有滤膜和缓冲液的烧杯中,旋转均匀。 13. 于 42 ℃振荡(轻轻摇动) 4~16 小时
避免使用毛刷和铬酸洗液。 洗净的仪器器壁应能被水润湿,无水珠附着在上面。 用以上方法洗涤后的仪器,经自来水冲洗后,还残留有Ca2+、Mg2+等离子,如需除掉这些离子,还应用去离子水洗2~3次,每次用水量一般为所 2.化学试剂的取用 (1)固态试剂的取用 固态试剂一般都用药匙取用。药匙的两端为大小两个匙,分别取用大量固体和少量固体。 试剂一旦取出,就不能再倒回瓶内,可将多余的试剂放入指定
扩增长目的片段当扩增大于5kb的目的片段时,可以使用用于超长PCR的酶或酶混合物以获得最佳产量(图24)。Taq DNA聚合酶并不能有效扩增较长目的片段(大于5kb),可能是因为其缺少3'-5'外切核酸酶活性,不能纠正dNTP错误掺入。错误配对的延伸几率大大降低,减少了较长产物的产量。将Taq DNA聚合酶同带有3'-5'外切核酸酶活性的热稳定DNA聚合酶混合,可以扩增最高为30kb的目的片段。Platunum Pfx DNA聚合酶(带有3'-5'外切核酸酶活性)也可以扩增较长产物(≤12kb
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