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- 详细信息
- 文献和实验
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RT
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见标签
- 库存:
999
- 供应商:
联硕生物
- 规格:
2ML

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文献和实验称取待测的核酸样品0.5g,加少量蒸馏水(或无离子水)调成糊状,再加适量的水,用5%-6%氨水调至pH7,定容至50mL. (2)取两支离心管,甲管内加入2mL 样品溶液和2mL 蒸馏水;乙管内加入2mL 样品溶液和2mL 沉淀剂(沉淀除去大分子核酸,作为对照)。混匀,在冰浴(或冰箱)中放置30min,3 000r/min 离心10min。从甲、乙两管中分别取0.5mL 上清液,用蒸馏水定容至50mL.选用光程为1cm 的石英比色杯,在260nm 波长下测其光密度。 (3)计算
一次OD600nm,至OD600nm≤0.5时停止培养; (2) 每组取培养液3个2ml转入2ml离心管中,在冰上冷却20-30min,于4℃,4000r/min离心10min(从这一步开始,所有操作均在冰上进行,速度尽量快而稳); (3) 倒净上清培养液,用1ml冰冷的0.1mo1/L CaCl2溶液轻轻悬浮细胞,冰浴; (4) 0~4℃,4000r/min离心10min; (5) 弃去上清液,加入500µll冰冷的0.1mo1/L
g,在2~5℃下解冻,切成小块,用组织捣碎机中绞碎成胰浆,在5~10℃存放24h以上,使胰酶自身活化。胰浆中加入25%(质量分数)乙醇溶液250mL(25%乙醇溶液中加0.015mol/L HCl 、0.05mol/L CaCl 2 ),捣碎机中捣碎1min。胰浆倒入500mL 烧杯 中,间隙搅拌,温度20℃左右,活化5~6h。每隔1.5h,吸取2mL活化液用于测定激活后的蛋白质含量和酶活性。活化反应结束后,胰浆3 500 r/min离心20min,将离
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