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文献和实验干货 | CUT and Tag 核心酶 Hyperactive PA/PG-Tn5 Transposase 大解密
PA/PG 寻找不同来源的抗体,结合在靶蛋白的附近后再进行切割。它的切割作用由 Tn5 转座酶实现,Tn5 转座酶作用机制主要分为三步: 01 转座酶(Tnp)分子(红色)与转座元件末端与特定的 19 bp ES 识别序列(白条)结合,形成两个 TnP-ES 复合体。随后两个 TnP-ES 复合体通过 TnP 的 C 末相互作用进行联会,形成 Tn5 转座酶复合体。 02 在 Mg2+ 存在下,Tnp 活化水分子,活化的水分子进行亲核攻击,水解 DNA
PRODUCTION OF COMPLETELY ES CELL-DERIVED FETUSES BY AGGREGATION WITH TETRAPLOID
The technique described here is a slight modification (March 1997) of methods presented in: Nagy A., J. Rossant. 1993. Production of completely ES cell-derived fetuses. In : Gene Targeting: A Practical Approach. (ed. A. Joyner). IRL Press at Oxford
/kg,不是巴比妥钠!应该配制的浓度3mg/ml,1ml/100g 体重,即30mg/kg。 如果此剂量不产生麻醉作用,说明巴比妥钠质量有问题。 2、戊巴比妥钠,2%的,就是100ml纯水加2克药,大鼠用0.2ml/100g。 3、戊巴比妥钠,1.5%的,就是100ml纯水加1.5克药,大鼠用0.2ml/100g,即30mg/kg,2%戊巴比妥钠50mg/kg,麻醉时间约为2小时左右。书上推荐的剂量是30~50mg/kg。做手术的30mg,麻醉不深。 4、3%的戊巴
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