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999
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联硕生物
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10G

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文献和实验免疫检测仪OD490nm处测量各孔的吸光值。7.同时设置调零孔(培养基、MTT、二甲基亚砜),对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜)悬浮细胞:1)收集对数期细胞,调节细胞悬液浓度1×106/ml,按次序将①补足的1640(无血清)培养基40ul ;②加Actinomycin D(有毒性)10ul用培养液稀释 lg/ml,需预试寻找最佳稀释度,1:10-1:20);③需检测物10ul;④细胞悬液50ul(即5×104cell/孔),共100ul加入到96孔板(边缘孔用无菌水填充
萘酚贮存液的准备:用 10 mL 无水乙醇溶解 0.3 g 氯萘酚,贮存于 -20℃; (2) 加 100 μL 氯萘酚贮存液至 10 mL 0.05 mol/LTris(pH7.6); (3) 加0.1 mL 3% 过氧化氢于水中。过氧化氢一般是以 30% 的溶液提供,4℃ 可存放 1 个月; (4) 白色沉淀可用滤纸过滤去除; (5) 加此溶液到标本中,并在室温孵育 10~40 min,水洗终止反应; (6) 优化:如果需要,进行复染,但只可使用水溶性染料; (7) 用 Gelvatol
Protocols for protein extraction from whole tissues for isoelectric focusing
at 2530℃ Incubate sample for 1 h at room temperature with agitation.Do not heat sample under any circumstances as this will lead to carbamylation of proteins. 10.Centrifuge for 10 min at 12000 g and use supernatant to rehydrate IPG strips. 11.If protein
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