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- 文献和实验
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RT
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见标签
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999
- 供应商:
联硕生物
- 规格:
5G

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文献和实验表达材料: ( 1 ) LB (Luria—Bertani))培养基: 酵母膏 (Yeast extract) 5g 蛋白胨 (Peptone) 10g NaCl 10g 琼脂 (Agar) 1-2% 蒸馏水 (Distilled water) 1000ml pH 7.0 适用范围:大肠杆菌 ( 2 ) IPTG 贮备液: 2 g IPTG溶于10 mL 蒸馏水中,0 . 22 μm 滤膜过滤除菌,分装成1 mL /份,-20 ℃ 保存
草酸铵1.2s、草酸钾0.8 g,加蒸馏水至100mL。为防止霉菌生长,可加40%甲醛溶液1 mL。 十八、柠檬钠抗凝剂 常配成3%-5%蒸馏水溶液。每毫升血加3-5mg即可达到抗凝目的 十九、D―76显影液 称取米吐尔28g,无水亚硫酸钠100g,几奴尼5g,硼砂2g,依次逐个溶解于750mL(50 ℃)的水中,最后加水至1 000 mL。 二十、D―72显影液 称取来吐尔3.1g、无水亚硫酸钠45
子为PL 启动子,则在30 -32 ℃ 培养数小时,使培养液的OD600达0.4-0.6 ,迅速使温度升至42 ℃ 继续培养3 -5h ;如果表达载体的原核启动子为tac 等,则37 ℃培养细菌数小时达到对数生长期后加IPTG 至终浓度为1 mmol / L。继续培养3 -5h 。 ( 5 )取上述培养液1 mL , 1000g 离心,1 min ,沉淀,加100 μL 聚丙烯酰胺凝胶电泳上样缓冲液后,作SDS -PAGE 检测。 2、大肠杆菌包涵体的分离与蛋白质纯化 1 )细菌
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