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- 生夏/华利世
- HLS LYS001C
- 中国
- 2025年11月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
999
- 英文名：
rLys-C，25u, Mass Spectra Grade
- 保质期：
24个月
- 供应商：
北京生夏蛋白技术有限公司
- 保存条件：
-20度
- 规格：
20ug
质谱级rLys-蛋白酶特异性水解在赖氨酸片段的C端的肽键。可用于提高对不易水解的蛋白质的消化; 推荐在6-8M尿素溶液中进行
物理形态: 质谱级rLys-C蛋白酶是冻干粉，含0.5mg海藻糖/瓶
分子量:27kDa.
溶解液（HLS HAc001C）：rLys-C蛋白酶复溶解缓冲液建议50mM醋酸
储存条件：冻干粉末存储在-20℃冰箱，再溶解的酶储存在-20℃。有效期见产品标签
保质期：冻干粉-20℃保质期24个月
pH 值范围: 在8-9 时，rLys-C 具有很好的活性
适用范围：rLys-蛋白酶特异性水解变性后比较不易酶切的蛋白质K位，推荐和Trypsin混合使用。
混合酶推荐SOP:
A. 通用溶液酶解法
100ug Trypsin/20ug rLys-C 混合酶按照 25:1 蛋白和蛋白酶的量(w/w)使用, 37°C恒温过夜13-16小时.
温馨提示：尿素的浓度最好小于1M, 50mM Tris-HCl 缓冲溶液(pH 8)
B. 1+1步溶液酶解法
1. 100ug Trypsin/20ug rLys-C 混合酶按照25:1 蛋白和蛋白酶的量(w/w)使用, 37°C.恒温酶解2-4小时.
温馨提示：尿素的浓度为6-8M, 50mM Tris-HCl 缓冲溶液(pH 8)
2. 稀释上一步的溶液6倍，37°C恒温过夜13-16小时
温馨提示：尿素的浓度最好小于1M, 50mM Tris-HCl 缓冲溶液(pH 8)
质量控制｜Quality Control
纯度： 液相色谱280nm检测杂质蛋白质峰强度，rLys-C峰强度大于99.9%
专一性：E.coli大肠杆菌样品，ESI-MS/MS质谱分析K端的专一性大于99.5%
活性:25unit/min/mg; 单位定义：rLys-c白蛋酶每分钟酶切1.0 umole T-G-P Lys Nitroanilide的量，反应条件：25℃，波长405nm
Maldi TOF质谱检测: 纯化后的蛋白酶使用HCCA基质激光解析质谱分析未见杂质蛋白质峰
LC-MS/MS 质谱分析: 使用rLys-c酶解HSA(人血清白蛋白，纯度99.9%)实验，DTT还原，IAA保护,PH8.0, 37°C恒温过夜16小时,液质QE联
用仪分析，覆盖率87%
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文献和实验一部分鳞翅目昆虫的蛹分泌的蛋白质分解酶，是孵化酶的一种。它能将茧的丝胶蛋白分解，仅存丝心蛋白（ fibroin），以便成虫易于从茧中脱出。是 Duspiva（ 1950）在蚕中发现的，并称之为丝胶蛋白酶（ sericinase），但 1964年后， F． C． Kafatos等，经用醋酸等处理、提纯，在进一步确定此酶性质的基础上，将之命名为蚕蛋白酶（ cocoonase） EC 34． 21． 4。此酶形成于蛹的小颚外叶的腺细胞中，在羽化前分泌出来，并以干燥的、较纯的酶粉形式
金属蛋白酶 无特异性 EDTA,EGTA,Hg2+ , 重金属 内肽酶Arg-C 丝氨酸蛋白酶 在R之后 a-巨球蛋白，TLCK 内肽酶Asp-N
指脊椎动物胃液中的蛋白酶，是典型的肽链内切酶，底物特异性广，但对邻接疏水性氨基酸残基的肽键能相当的水解。等电点在 pH=1附近。活性的最适 pH约为 2（以变性蛋白质做底物时约为 3.5）。在猪中除得到主要成分胃蛋白酶 A（ EC3.4.23.1）外也得到胃蛋白酶 B和 C。各种胃蛋白酶都是以无活性的前体物质胃蛋白酶原（ pepsinogen） A、 B、 C的形态分泌出来，在胃液的酸性条件下自我催化而激活。胃蛋白酶原 A的等电点为 pH3.7，分子量约 4万。氨基末端的残基
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