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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 供应商:
上海然其生物科技有限公司
- 英文名:
Opti-MEM I
- 规格:
500ml//100ml
| 规格: | 500ml | 产品价格: | ¥367.2 |
|---|---|---|---|
| 规格: | /100ml | 产品价格: | ¥750.6 |
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文献和实验一种应激状态,本来就长不好,这时候你投毒,当然更差。lipo2K不是不计较培养基是否有血清吗,所以在“双无”培养基稀释lipo2K 和RNA,形成复合物后可以投到含血清的无抗生素的培养基中。实际上我们转染用的培养基,double血清含量(普通5%,转染用10%)。早期lipo 的说明书要求“双无”,3hr后添加double血清培养基。实际操作发现,也可以直接投入double血清培养基中。 7.无抗生素的原因是,细胞膜被穿孔,抗生素进入直接杀细胞。 经验推荐:OPTI-MEM
(ug)与脂质体(ul)混合的比例应为1:2至1:3。例如:对24孔板中一个孔的细胞(0.5-2×105)来说,需0.8-1ug DNA和2-3ul 脂质体。 2. 推荐细胞在转染前密度应达到90%-95%,这关系到转染的效率。 3. 转染用培养基不应加抗生素,以避免造成细胞死亡。 为取得满意结果,我们有以下建议: 1. 在与DNA混合前,使用Opti-MEM I Reduced Serum Medium(Catalog no. 31985-062) 稀释脂质体。其他无血清培养基(如D
入培养箱中培养; 6) 培养6-8小时后观察,细胞如果一切正常的话,换含血清的培养基,换液时要洗2-3次,换液后继续培养24-36小时。 配方: IMDM培养液(购自GIBCO公司),含10%胎牛血清(FBS)、1%非必需氨基酸、1μM 二氢睾酮(DHT)(培养附睾上皮细胞需要加,COS7不用)(以上均购自PAA公司); T/E:培养基中含有:5%胰 蛋白酶 ,0.53M EDTA )
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