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10
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广州市左克生物
- CAS号:
1073549-11-7
- 规格:
10mM*1mL/1mg/5mg/10mg
| 规格: | 10mM*1mL | 产品价格: | ¥4139.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1mg | 产品价格: | ¥1147.0 |
| 规格: | 5mg | 产品价格: | ¥2932.0 |
| 规格: | 10mg | 产品价格: | ¥4462.0 |
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文献和实验干货 | CUT and Tag 让 ChIP-Seq更简单高效!
&Tag 技术的实验流程简单,可一步实现 DNA 的片段化和接头连接,仅需 9h 即可实现从细胞到二代测序文库的转化。 实验流程主要包括:①收集细胞;②分别孵育一抗和二抗;③孵育 pA/pG-Tn5 转座子(Hyperactive pA/pG-Tn5 Transposon);④激活转座子,进行 DNA 片段化;⑤DNA 提取;⑥文库扩增与纯化。 1. 细胞起始量低 投入不同起始量的 HEK293 细胞( 100 或 10,000 个细胞),按照 Vazyme #TD901
,首先第一个Fmoc氨基酸通过一个酸性接头接到不溶载体树脂上,Fmoc去保护通过用碱处理树脂来完成,一般是Poperidine。 用预先激活或原位激活连接第二个Fmoc氨基酸。要求总多肽合成后,通过TFA分离来除去树脂和去保护。 Fmoc分离 固相多肽合成中多肽分离主要用酸解 Fmoc法用弱酸,比如TFA或TMSBr。各种添加剂, 一般为thiol compound , 水和酚,用来保护多肽的免分离中Carbocation的破坏。 下列保护基与TFA和TMSBr分离相合
原理基因组步行技术是一种新发展的利用已知序列(cDNA或基因组DNA)从基因组中获得基因的上游(如启动子)或下游序列的方法。其原理如下:首先利用不同的具有平末端的 DNA 限制性内切酶消化基因组 DNA,然后将预先设计好的 DNA 接头连接在 DNA 的两端。这样的一组两端带有接头的 DNA 片段就称为所谓的无载体的 DNA 文库;根据接头和目的基因的序列设计两组引物,以上述的DNA为模板,先以外侧的一组引物进行第一轮 TD-PCR (touchdownPCR )扩增,然后以内侧的一组引物进行
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