HBSS平衡盐溶液（无钙, 镁，有酚红）C3573-0500

细胞培养升级篇

匀，都会造成沉淀物的增多。 细胞分离试剂 1. 大部分连续细胞系，强贴壁细胞系，许多早代细胞 HBSS或无钙镁PBS 0.25％胰蛋白酶溶解在无钙镁平衡盐溶液中2. 细胞表面蛋白完整性重要的连续细胞系 HBSS或无钙镁PBS 0.05％胰蛋白酶溶解在0.53mM EDTA3. 弱贴壁表皮细胞转化成纤维细胞（要求细胞表面完整性），原代细胞 HBSS或无钙镁PBS EDTA,甘油 溶解在柠檬酸钠中4. 强贴壁早代细胞系 HBSS或无钙镁PBS 0.25％

细胞分离技术

1. 从原代组织中分离细胞 将组织块分离（散）成细胞悬液的方法有多种，最常用的是机械解离细胞法、酶学解离细胞法以及螯合剂解离细胞法。 从原代组织中获得单细胞悬液的一般方法是酶解聚。细胞暴露在酶中的时间要尽可能的短，以保持最大的活性。下列步骤可以解聚整个组织，获得较高产量的有活性细胞。 （1）胰蛋白酶 (Trypsin) ●在去除不需要的组织后，使用无菌的解剖刀和剪子把剩余的组织切成3~4 mm小片，通过悬浮在无钙镁的平衡盐溶液中清洗组织碎片。让组织碎片沉淀，去除上清

实用哺乳动物细胞培养手册（下）

工作液浓度为 0.02%。通常与 0.25% 的胰蛋白酶溶液按 1：1 混合使用（混合液）。注意：使用 EDTA 处理细胞后，一定要用 Hanks 液冲洗干净，因残留的 EDTA 会影响细胞生长。EDTA 溶液配制：用无钙、镁的 D-HBSS 平衡盐溶液溶解后，高压蒸汽灭菌，分装成小瓶， 室温或 4℃ 冰箱保存。胰蛋白酶–EDTA•4Na 溶液（0.05% 胰蛋白酶, 0.53 mM EDTA•4Na）0.5 g 胰蛋白酶＋0.2 gEDTA•4Na＋1L D-HBSS。-20℃ 冰箱中保存。pH