- ￥1100
- 普迈福
- KS1001-50T
- 吉林长春
- 2025年09月05日
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
现货
- 供应商：
普迈福
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
100μg
Cas13a核酸酶产品说明书
产品名称：
Cas13a核酸酶
产品介绍：
LbuCas13a核酸酶是一种来自Leptotrichia buccalis细菌的RNA介导内切酶。Cas13a属于2类VI型CRISPR-Cas系统，包含一个具有两个HEPN结构域的单一蛋白效应体。Cas13a表现出两种不同的核糖核酸酶活性。Cas13a在体外和体内均具有序列特异性RNA切割活性。与target RNA的结合会使LbuCas13a两个HEPN结构域发生构象变化，激发LbuCas13a非特异性地切割临近的任意单链RNA。Cas13a的两种不同的核糖核酸酶活性使引导RNA加工和RNA检测成为可能。以Cas13a-crRNA复合物和猝灭的荧光ssRNA为报告基因的RNA检测方法具有多用途、快速和高特异性的特点。
来源：
大肠杆菌表达的重组Cas13a
浓度：
4毫克/毫升
分子量：
在非还原条件下，在SDS-PAGE上约180kDa
储存缓冲液：
20 mM HEPES-K, 200 mM KCl, 10% 甘油, 1 mM TCEP，pH 7.0
储存和稳定性：
自制造之日起，长期存储建议-80℃，短期使用存储可-20℃，避免反复冻融循环；干冰运输；
应用方向：
crRNA依赖性RNA切割
产品组分：
|
Cas13a Nuclease |
100ul |
500ul |
|
Cas13a Nuclease Reaction Buffer(1X) |
5ml |
5ml X 5 |
质量控制规范：
|
Assay |
Specifications |
|
Appearance |
Clear, colorless liquid |
|
Purity by SDS-PAGE |
≥ 90% |
|
Activity |
≥ 85% by in vitro digestion of ssRNA |
|
Concentration |
4 mg/ml±10% as analyzed by A280 |
注意事项：
1.实验中请保持实验区环境整洁，操作时需穿戴干净的手套、口罩，实验所用枪头、离心管等耗材均为 Nuclease-free。
2.操作环境需定期使用RNA去污剂进行处理，避免气溶胶污染。
3.Cas13a对热敏感，应全程冰上配置体系，在使用后立即将其放置于-20°C 中保存，长时-80°C保存。
反应体系：
|
组分 |
体积（μL） |
终浓度 |
|
RNP（2.85 μM） |
1.75 |
100 nM |
|
RNase inhibitor（40 units/mL） |
1.25 |
1 unit/mL |
|
Reporter RNA（20 μM） |
1 |
400 nM |
|
靶标RNA |
1 |
根据实验要求设定 |
|
切割缓冲液 |
45 |
|
实验方法：
将Cas13a与crRNA按1:1的比例37℃混合15分钟，配制成终浓度为5 μM 的RNP复合物。复合物用反应液稀释至100 nM，加入1U/mL的RNA酶抑制剂和400 nM reporter RNA（FAM标记），1 μL target RNA激活Cas13a反应体系。荧光酶标仪设置激发光波长485 nm，发射光波长520 nm，每5分钟检测荧光值（不同仪器检测基数会有差别，但数据趋势一致）。
实验观察加入target RNA后相较于未加入时，反应体系中检测到明显增强的荧光，证明Cas13a体系的有效性。
本产品仅供科研使用。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
