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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
12个月
- 供应商:
博鹭腾
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
CPH001(1mg)
产品介绍
HOE 33187是一种DNA细胞染料。它具有良好的荧光亮度和稳定性,可以用于细胞核和染色体的荧光染色,以及DNA分子的可视化和定量分析。此外,HOE 33187还可以用于研究DNA的结构和功能,如DNA的超螺旋结构、DNA的双链断裂和DNA的交联等。结构见下图。
保存条件
冰袋(wet ice)运输;-20℃保存,12 个月有效。
使用说明
1.工作液的配制
1)制备储存液
用 DMSO 配制 1 mg/mL 的储存液。
注:储存液建议分装后于 -4℃ 或 -20℃ 避光保存。
2)工作液的配制
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液,终浓度为 10 μg/mL工作液。
注:请根据实际情况调整工作液浓度,且现用现配。
2. 细胞染色(悬浮细胞)
1)离心收集细胞,加入 PBS 洗涤两次,每次 5 分钟。细胞密度在 1×106/mL
2)加入 1 mL 工作液,室温孵育 3-10 分钟。
3)400 g,离心 3-4 分钟,弃去上清。
4)加入 PBS 洗涤细胞两次,每次 5 分钟。
5)用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后,使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
3. 细胞染色(贴壁细胞)
1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
2)从培养基中移出盖玻片,吸除多余培养基。
3)加入 100 μL 染料工作液,轻轻晃动使其完全覆盖细胞,孵育 3-10 分钟。
4)吸去染料工作液,用培养基洗 2-3 次,每次 5 分钟,使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
DMSO 中的溶解度 : 2 mg/mL (4.90 mM; 超声助溶; 吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的 DMSO)
注意事项
1. 请根据实际情况调整工作液浓度。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内!
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文献和实验(Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI。三种种染料与DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。 Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释,终浓度为10 ug/ml。 DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色。储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为10 ug/ml。 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期
、变圆、脱落。(2)染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。常用的 DNA 特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258),DAPI。三种种染料与 DNA 的结合是非嵌入式的,主要结合在 DNA 的 A-T 碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。Hoechst
Hoechst 33258染色1.原理 Hoechst 33258和Hoechst 33342均为非嵌人性荧光染料。它们在活细胞中 DNA聚AT序列富集区域的小沟处与DNA结合。活细胞或固定细胞均可从低浓度溶液中 摄取该染料。从而使细胞核着色。故又把此类染料称为DNA探针。Hoechst 33342和Hoechst 33258均可溶于水并在水溶液中保持稳定。Hoechsr-DNA的激发和发射波长分别550nm和460nm。在荧光显微镜紫外光激发时,Hoechst-DNA发出亮蓝色荧光
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