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Pannarase耐高盐全能核酸酶

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  • CY006F0010
  • 2025年08月21日
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    • 供应商

      广州市左克生物

    • 规格

      100 kU

    产品性质:

    项目

    描述

    规格

    10/50/500U/

    分子量

    16kDa

    纯度

    ≥99%  (SEC-HPLC)

    比活性

    ≥2x106 U/mg

    最适pH

    8.5-10

    最适温度

    37°C

    辅助因子

    0.55-5 mM Mg2+0.5-10 mM Ca2+

    储存温度

    -20°C,避免反复冻融

    (由于甘油的存在,-20°C条件下不会冻住)

    活力单位:通过测定其裂解鲱鱼精DNA底物的能力(herring Sperm DNASigma,目录号D7290)一个单位Pannarase全能核酸酶活力定义为在37°C pH8.0反应条件下30分钟内导致A260值降低1.0(相当于完全消化37μg DNA)。


    产品特点:

    • 杰出单位比酶活
    • His标签纯化
    • 质谱均一性认证
    • 无动物源(AOF
    • 耐盐、耐碱性条件


    SDS-PAGE鉴定

    产品细节图片1

    非还原及还原的SDS-PAGE显示蛋白分子量约16kDa,未见杂蛋白。


    SEC-HPLC纯度测定


    产品细节图片2

    尺寸排阻色谱显示高纯度,无聚集体产生。


    应用案例:

    1. Na+离子对Pannarase酶活性的影响

    产品细节图片3

    Pannarase在中等Na+浓度条件下活性较高,300 mM时仍有36.2%的活性,但浓度超过600mM时酶活性基本完全丧失。


    2. Mg2+离子对Pannarase酶活的影响

    产品细节图片4

    1 mM Mg2+可以提升Pannarase内切酶40%左右的活性,但Mg2+并不是必须的


    3. Ca2+离子对Pannarase酶活的影响

    产品细节图片5

    1 mM Ca2+可以提升Pannarase内切酶28%的活性,但Ca2+并不是必须的


    4. 不同pH条件下Pannarase酶活性比较

    产品细节图片6

    Pannarase酶活性最适pHpH8.0 - 11.0


    运输和保存方法:干冰运输。-15℃ ~ -25℃保存,有效期2年。


    推荐使用条件:

    条件

    最适条件*

    有效条件#

    Mg2+

    0.55-5 mM

    0-10 mM

    Ca2+

    0.5-10 mM

    0-10 mM

    pH

    8.5-10

    7.0-11.0

    Na+

    0-150 mM

    0- 500 mM

    *“最适条件指的是在此条件下Pannarase核酸酶可保持>90%的活性

    **“有效条件指的是在此条件下Pannarase核酸酶可保持>15%的活性

    注:具体参数可参见Pannarase 产品性能部分


    使用方法:

    1.对于大肠杆菌破碎液

    为了达到降低粘度的目的,加入核酸酶的用量须根据破碎液的菌体浓度来决定,如果菌体浓度在50%,建议加入的核酸酶的量为11000-51000,即50-250U/L。如果菌体浓度在5%,则可以按照110000-510000的比例加入。

    2.对于细胞裂解液

    可以按照106-107个细胞加入500单位核酸酶。

    3.对于纯化后的腺病毒或者病毒疫苗

    由于DNA含量相对较少,可以按照万分之一到万分之五也就是每毫升5个单位的最终浓度加入。


    注意事项:

    1.酶的最佳作用条件为pH 8.0–11.037°C30min

    2.酶活性比较稳定,室温放置短期内不会有太大影响,长时间保存需放置在-20°C冰箱内。酶用不含甘油缓冲液稀释后尽快使用,不推荐冻存后再使用。

    3.对于仅为降低粘度为目的,可以直接加入核酸酶,室温缓慢搅拌30 min


    订购信息:

    产品货号

    产品名称

    级别

    产品规格

    CY006F0010

    Pannarase耐高盐全能核酸酶

    科研级

    100 kU

    CYG006F0010

    Pannarase耐高盐全能核酸酶

    GMP级

    100 kU

    CYG006F0050

    Pannarase耐高盐全能核酸酶

    GMP级

    500 kU

    CYG006F0500

    Pannarase耐高盐全能核酸酶

    GMP级

    5000 kU


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      ,甘油浓度过高。 3. 答: 回文序列是:5'-CATATG-3, 4. 答: GATATC;AAATTT,因为它们是回文序列。 5.答: 注意星活性,先低盐,后高盐;先低温酶,后高温酶;并且可以直接在换酶前将第一 种酶失活,再加第二种酶,否则,易产生星活性。或使用通用缓冲液。 6. 答: 由于反转录酶缺少在E.coli DNA聚合酶中起校正作用的3'-5'外切核酸酶活性,所以聚合反应往往会出错,在高浓度的dNTP和Mg2+下,每500个碱基中可能有一个错配。 7. 答: 所谓

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