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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
广州市左克生物
- 规格:
1000 mL/瓶
产品简介:
品牌:达优
货号:6111021
产品名称:SUPERCULTURE L500淋巴细胞无血清培养基
产品规格:1000 mL/瓶
订购须知:
1)所有产品仅可用于科研目的的生物学实验(forresearchuseonly),严禁用于人体或动物的医疗目的
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文献和实验体,后续培养后收集的细胞上清中的外泌体不确定是从细胞分泌的还是血清中来的,影响结果的准确性。 2. 营养:细胞培养是需要一定的营养的,那么如果不加血清,单独只用基础培养基,就会导致细胞处于饥饿状态,严重影响细胞生长,甚至出现吞噬外泌体的现象,影响实验结果。 3. 杂蛋白:去外泌体胎牛血清可以很好地解决 1、2 中涉及的问题,但还会存在杂蛋白影响蛋白定量结果,导致数据偏高,影响后续实验的准确性。如果使用外泌体专用无血清培养基(专门针对外泌体获取的培养基,化学成分明确,类似于完全培养基的一种
) 2. 共孵育/细胞摄取 2.1. 提前 24 h 铺 24 孔板 (先放置细胞爬片),将细胞悬液浓度调整为适当浓度,每孔加入 300 μL 细胞悬液,约 2×104 个细胞 2.2. 避光操作:用无血清培养基将染色样本 EVs 浓度调整为适当浓度 2.3. 吸除待处理细胞原有的培养基,用 PBS 清洗两次 2.4. 避光操作:加入 300 μL 含染色 EVs 的新鲜培养基,染色 EVs 的粒子数约为 1×1010 个/孔,在细胞培养箱避光孵育 24 h 3. 细胞染色 3.1. DIO 细胞
液:用 DMSO 配置终浓度为 5 mM 的 CFSE 溶液(1000×)RPMI 1640 完全培养基:RPMI 1640 培养基 + 10% 血清 + 1% 双抗☟☟☟— 实验正式开始 —1. 脾淋巴细胞的制备无菌操作取出小鼠脾脏,研磨成单细胞悬液,用红细胞裂解液或者小鼠淋巴细胞分离液去除红细胞,将细胞过 40 μm 细胞滤网后,进行细胞计数。样本清洗液洗涤(可用 PBS 或者不含血清双抗的培养基代替),1 500 rpm 离心 5 min,用 PBS 重悬,调整细胞浓度为 107/ml。2. CFSE
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