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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
190
- 英文名:
pOTB7-ATG3(多一个碱基 )(human)
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
少量干粉质粒/大提液体质粒
| 规格: | 少量干粉质粒 | 产品价格: | ¥280.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 大提液体质粒 | 产品价格: | ¥480.0 |
别称:NM_001278712.2(多一个碱基 );"APG3; APG3-LIKE; APG3L; PC3-96"
基因长:936bp
质粒宿主:大肠杆菌
质粒用途:基因模板
片段类型:cDNA
片段物种:人
原核抗性:Chl
筛选标记:
荧光标记:
启动子:
复制子:pUC
感受态:DH5a
温度:37度
正向引物:M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT
反向引物:M13R:CAGGAAACAGCTATGACC
注意事项:本产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药。
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文献和实验CRISPR-Cas9 全程实操教程:从 gRNA 设计到挑单克隆全程指导
的原件与表达 Cas9 的原件相连接,得到可以同时表达两者的质粒,将其转染细胞,便能够对目的基因进行基因操作,在 PAM (5'-NGG) 上游~3bp 进行切割,如下图所示。因此本实验的关键步骤是设计一对 20bp(不包括 NGG 在内的)完全互补的 oligo 插入到如上图所示的 filler。另 U6 启动子需要 5' 端的 G 起始转录,因此若设计的 oligo 第一个碱基非 G,需额外增加一个 G。操作详细流程1. 设计 sgRNA关于 sgRNA 的设计我们有专门开过一篇文章《一文掌握
。 下面,我就我的经验,小结一下我这方面的经验。 具体步骤如下: 一,通过PUBMED或者CNKI,万方等数据库总归可以查到P这个位点的引物。 二,得到引物进入BLAST(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/),进行nucleotide blast 。 注意:正反引物都BLAST。 三,比较两引物的BLAST结果,选取结果相同的项目 ,得到PCR产物从第一个碱基到最后一个碱基在基因全长上的位置。例如:313324—313943 四,选取一个
.1 3.1 +52 Cleavage and polyadenylation specificity factor U37012.1 4.5 +57 Human insulin-like growth factor 2 receptor NM000876
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