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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
(S)-Benzyl 2-amino-3-(3-(methylsulfonyl)phenyl)propanoate hydrochloride
- 库存:
999
- 供应商:
智溯科ZSK
- CAS号:
1194550-59-8
- 规格:
10mg///100mg///200mg
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文献和实验Construction of Gene-Targeting Vectors by Recombineering
) Fast-Media and agar (InvivoGen) This is used to prepare media containing one of the following: Blasticidin S hydrochloride (Blasticidin; Bsd) Puromycin (Puro) Prepare agar and TB (liquid medium
、离心后去上phenyl-sephorase柱。但发现活性大部分还在沉淀中。测了一下蛋白浓度是20mg/ml。是不是浓度太高啊? 30%-60%硫酸铵沉淀可能对你的目的蛋白来讲,太粗略了,如你所言,目的蛋白可能在沉淀中,可否分级沉淀,30%-50%,50%-60%,再测一下活性可能就分开了,20mg/ml的蛋白浓度对于层析是有点高,洗脱液浓度变化或PH的改变都会使蛋白有损失,最好不要超过10mg/ml。 59) 我的蛋白是用pGEX-4T载体在BL21中表达的,表达量很高,形成包涵
?其实这个问题我觉得是这样的,既然你是提取那肯定是有沉淀和上清,你的目标蛋白的分子量你是应该知道的,那么跑电泳先看它到底是在上清还是沉淀里,剩下的问题你再解决如何提取。对于不同的酶要看酶稳定如何,你可以用不同的PH去提取,我曾经提取一个酶用水就是提取不出来,需要用盐才能提取出来,多试试,设计个方案,这样才能解决问题,所以不一定加甘油就管用,你还得注意破碎本身会不会有问题,倒回去做做也许能找到真正的原因。有什么问题继续探讨。6)HPLC是用来分析检测or分离纯化?如果可以用来纯化,上样量那么小有什么
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