- ￥1056
- BNCC
- BNCC376229
- 2025年08月19日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
见包装
- 保质期：
见包装
- 英文名：
pLV3-CMV-Spike-SARS-Cov-2-CopGFP-Puro
- 库存：
现货
- 供应商：
广州市左克生物
- 规格：
甘油菌
产品简介:
品牌：BNCC
货号：BNCC376229
产品名称：DH5α（含pLV3-CMV-Spike-SARS-Cov-2-CopGFP-Puro质粒）大肠杆菌
规格：甘油菌
品牌介绍:
北纳生物是一家专注于细胞、微生物菌种领域,集研发、生产和销售为一体的生物高科技企业,设有细胞库、微生物菌种库,细胞培养、菌种培养、分子生物学实验等实验室,全方位满足您的需求。
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文献和实验（细菌内同源重组AdEasy System）一、目的基因的克隆（以pshuttle-CMV质粒为例）步骤1、选择适当酶切位点，进行酶切连接，将目的片段插入pshuttl-CMV质粒多克隆位点。2、重组质粒鉴定： 酶切鉴定或测序。3、重组质粒扩增，纯化并准备适量含目的基因的穿梭质粒。4、用PmeI单酶切线性化重组穿梭质粒，电泳鉴定质粒完全被切开。5、胶回收线性化质粒，以备共转化使用。二、共转化 1、大肠杆菌BJ5183电转感受态制备 （1）从新鲜琼脂板上挑取单个BJ5183细菌，接种于LB
最小的菌落）,接种于3ml含25-50mg/ml的LB培养基，37℃培养10-15hr。 8 碱裂法提取质粒，0.8%琼脂糖凝胶电泳筛选，大质粒为可能阳性克隆，进一步酶切鉴定。以PacI单酶切，0.8%琼脂糖凝胶电泳如显示出一条大片段（约30kb）,及一条小片段（约3.0或4.5kb）（同时可进行其它酶切鉴定），则基本确定为阳性克隆。 9 取1-5µl 阳性质粒转化至DH5α大肠杆菌细胞（BJ5183为recA+,质粒DNA易发生突变，DH5α或JM109，XL1-blue菌株
结构具有质粒的基本元件和抗性基因，则可在用其转化大肠杆菌后形成抗性菌落。如果两个loxP位点反向排列，Cre则诱发倒位反应。在不同的DNA分子上，Cre则介导缺失、重复、插入以及易位等反应。 Cre/LoxP位点特异性重组系统也是由穿梭载体和骨架载体构成，各含有一个同向排列的LoxP位点，其中骨架载体还含有由CMV启动子调控的Cre基因。将穿梭载体与骨架载体共转染包装细胞株（293、911以及PERC6等），骨架载体所携带的Cre基因开始表达，介导两个LoxP位点之间的重组，剪切掉骨架
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