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见包装
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见包装
- 英文名:
Escherichia coli TG1(pCANTAB-5E)
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现货
- 供应商:
广州市左克生物
- 规格:
冻干粉;斜面;菌液;平板
产品简介:
品牌:BNCC
货号:BNCC384449
产品名称:TG1(含pCANTAB-5E质粒)大肠杆菌
规格:冻干粉;斜面;菌液;平板
品牌介绍:
北纳生物是一家专注于细胞、微生物菌种领域,集研发、生产和销售为一体的生物高科技企业,设有细胞库、微生物菌种库,细胞培养、菌种培养、分子生物学实验等实验室,全方位满足您的需求。
说明:1、细胞&菌种等产品规格有多种时,默认发第一种规格,不同规格价格不同,具体找客服联系; 2、北纳细胞&菌种货期可参考:冻存细胞现货当天可发出。复苏细胞需要7-15个工作日;菌种一般默认发冻干粉;其他如菌液或者平板等形式需要7-15个工作日。
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文献和实验大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶E292对于氨基酰化活性的作用
双酶切后,嵌入表达载体pTrc-99B的NcoI和HindIII两个酶切位点间的切口内。得到的LeuRS 6个变种酶基因的正确性用DNA测序证实。 2. LeuRS及其变种酶基因的表达和纯化 1) 将含有LeuRS及其六个变种酶LeuRS-E292K,LeuRS-E292F,LeuRS-E292S,LeuRS-E292D,LeuRS-E292Q,LeuRS-E292A的基因的重组质粒转化到在大肠杆菌菌株TG1中,挑选含有正确质粒的转化子至5 mL氨节
-PCR技术扩增出小鼠抗体重链、轻链可变区基因(VH,VL),PCR扩增条件为:94℃ 1?min,55℃ 2?min,72℃ 2?min。循环30次。用Linker将等摩尔量的VH,VL交联形成单链抗体可变区片段(ScFv)。经NotⅠ、SfiⅠ双酶切后,在T4连接酶的作用下与经同样双酶切的pCANTAB5E载体相连,转化入大肠杆菌TG1以构建鼠抗内毒素单链噬菌体抗体库。在援救噬菌体抗体库后,用内毒素淘筛特异性的ScFv,富集的噬菌体阳性克隆 重新感染TG1。然后在96孔板分别援救单个含特异性ScFv
2.5×1010个细胞/ml)。分装,-80℃或液氮保存待用。 2、病毒骨架质粒转化大肠杆菌,扩增,纯化。 3、将1-5ul (约1ug) 线性化的穿梭质粒及1ul(约100ng/ul)病毒骨架质粒(如pAdEasy-1)加入至含约40ul BJ5183电转感受态的EP管中混匀,冰上冷却。 4、将混合物加入电转杯,电击(1250-1500V/mm,5ms)。 5、电击结束取出样品,加入1ml SOC或LB培养液,37℃低速振荡40min。 6、取适当体积的电击转化细胞液涂于数个卡那霉素抗性
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