6-溴-3-甲酰色酮，AB67610-1g

如何做好 Southern 杂交？

体积的 0.5 M EDTA，以终止消化。然后用等体积酚抽提、等体积氯仿抽提，2.5 倍体积乙醇沉淀，少量 TE 溶解（参见 DNA 提取方法，但离心转速要提高到 12000 g，以防止小片段 DNA 的丢失）。如果需要两种酶消化 DNA，而两种酶的反应条件可以一致，则两种酶可同时进行消化；如果反应条件不一致，则先用需要低离子强度的酶消化，然后补加盐类等物质调高反应体系的离子强度，再加第二种酶进行消化。三、 基因组 DNA 消化产物的琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳是目前分离核酸片段最常用的方法，制备

RNA提取与Northern杂交

的吸管弃去上清液，用75%乙醇清洗沉淀物，小心搅拌，尽量使沉淀物能够漂浮在乙醇上面。10、离心。4度，7 000g，5分钟。11、用1毫升的吸管弃去上清液，在空气中干燥10分钟。12、用甲酰胺（做Northern）或者DPEC水（做RT-PCR）清洗沉淀物，剂量依RNA沉淀物的多少而定（范围为50-500微升），样品在55-60度下加热10分钟。然后保存在-80度冰箱中备用。二、RNA凝胶和浓度检测检测RNA的质量：检测18s和28s核糖体RNA，样品含总的RNA-rRNA、tRNA、mRNA

便于N-糖分析的单次用和高通量HILIC SPE及IgG对照标准品

蛋白 中N-糖的常规应用方法包括：通过PNGase F释放出多聚糖，采用具有荧光活性的2-氨基苯甲酰胺(2-AB)进行标记，然后采用亲水作用色谱法(HILIC)进行分离，最后由荧光检测器(FLR)进行检测(图1)。此工作流程中，比较复杂的是样品制备步骤。为使此过程更加直观，沃特世(Waters® )推出了GlycoWorks，将N-糖制备与分析 所需的诸多耗材组合在一起。最值得注意的是，GlycoWorks实现了HILIC SPE的前/后标记纯化步骤，这对于确保方法的稳定性而言非常重要。