DMT-dT亚磷酰胺单体，AB65003-1g

师弟问了我 25 个引物相关的问题

DNA 链的合成的，合成的方向是由待合成引物的 3′ 端向 5′ 端合成的，相邻的核苷酸通过 3′→5′ 磷酸二酯键连接。第一步是将预先连接在固相载体 CPG 上的活性基团被保护的核苷酸与三氯乙酸反应，脱去其 5′- 羟基的保护基团 DMT ，获得游离的 5′- 羟基。第二步，合成 DNA 的原料，亚磷酰胺保护核苷酸单体，与活化剂四氮唑混合，得到核苷亚磷酸活化中间体，它的 3′ 端被活化， 5′- 羟基仍然被 DMT 保护，与溶液中游离的 5′- 羟基发生缩合反应。第三步，带帽 (capping

看了这些引物合成技巧，老板再也不用担心我 P 不出来了

酸通过 3'→5' 磷酸二酯键连接。 第一步，将预先连接在固相载体 CPG 上的活性基团被保护的核苷酸与三氯乙酸反应，脱去其 5'-羟基的保护基团 DMT，获得游离的 5'-羟基。 第二步，合成 DNA 的原料，亚磷酰胺保护核苷酸单体，与活化剂四氮唑混合，得到核苷亚磷酸活化中间体，它的 3'端被活化，5'-羟基仍然被 DMT 保护，与溶液中游离的 5'-羟基发生缩合反应。 第三步，带帽（capping）反应，缩合反应中可能有极少数 5'-羟基没有参加反应（少于 2%

自动DNA合成仪仪器的故障排除

剂的分子筛含有大量的铁。有些溶剂从分子筛中滤出三价铁离子，这种分子筛与DNA键合，引起碱基修饰和核苷酸间的切除。其他金属离子可能也是有害的。2．试剂DNA合成时，脱氧核糖核苷单体中小量的高反应活性的杂质造成的影响非常大。应用大量过量单体，扩大了杂质的影响。检测比较困难，但应该引起高度注意。在催化剂、偶联剂和脱保护剂中的杂质一般影响较小。3．仪器DNA合成可以用很多不同类型的仪器进行，总的原则是既能应用于磷酰二酯法，也可用于亚磷酰胺三酯法。仪器一般分为4种类型：手动、半手动、半自动化和自动化（DNA