2×Taq?PCR?MasterMix?(含染料），AB64

qPCR常见问题及其分析

PCR产物的荧光值就可以。参比染料的作用是标准化荧光定量反应中的非PCR震荡，校正加样误差或者是孔与孔之间的误差，提供一个稳定的基线。现在很多公司已经把ROXTM配制在MasterMix或者Premixture里。如果反应曲线良好或已经优化好反应体系，也可以不加ROXTM染料校正。通常来讲，real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样，要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度在80-150bp 之间，所以只需要变性和退火就可以了。SYBR@Green等染料法，最好在PCR扩增程序结束

Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手

操作。 3. 每管或每孔都要换新枪头！不要连续用同一个枪头加样！ 4. 所有成分加完后，离心去除气泡。 5. 每个样品至少 3 个平行孔。 参比或者校正染料（reference dye，passive dye）常用的是 ROXTM （现在已经是ABI的注册商标了！）或者其他染料，只要不影响检测 PCR 产物的荧光值就可以。参比染料的作用是标准化荧光定量反应中的非 PCR 震荡，校正加样误差或者是孔与孔之间的误差，提供一个稳定的基线。现在很多公司已经把 ROXTM 配制在 MasterMix

师姐好，我是新来的小师弟，最擅长闯祸......

！1 Novoprotein 2×Taq Master Mix这是一款是将 PCR 反应所需的 Taq 酶、dNTPs、MgCl2 以及反应缓冲液预先配制成 2 倍浓度的混合物，专为常规 PCR 扩增反应优化，扩增长度可达 8kb，能高效扩增≤4kb 片段。灵敏度高，可从 0.05ng 人基因组 DNA 模板中扩增出特定基因片段。稳定性强，使用快捷，PCR 反应所必需试剂全集于一管之中，数分钟即可完成反应体系配制，经测试，染料的加入不影响 PCR 反应，在 PCR 反应完成后可直接电泳，节省时间。2 CommaPrep