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- 中国
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文献和实验In vitro RNA synthesis from plasmid-borne sequences
inhibitor (RNasin, Pharmacia)T7 or T3 RNA Polymerase (Gibco-BRL)2.5mM rNTPs (Promega)5 x T7/T3 RNA Polymerase Buffer (200mM Tris.Cl pH 8.0, 125mM NaCl, 40mM MgCl2 , 10mM spermidine, Gibco-BRL)RNase-free DNase I (Pharmacia)DEPC-treated, autoclaved, nano-pure
-HCl,pH 7.5. 10X Transcription Buffer: 400mM Tris-HCl, pH 8.0; 60mM MgCl2, 100mM dithioerythritol, 20mM spermidine, 100mM NaCl, 1U/ml RNase Inhibitor. Ethanol Precipitation of RNA transcripts: Note: Use DEPC treated H2O to make reagents. 1. Add 2.5 ul
for 15 minutes. 10X NTP Labeling Mix: 10mM ATP, CTP, GTP, 6.5mM UTP, 3.5mM DIG in Tris-HCl, pH 7.5. 10X Transcription Buffer: 400mM Tris-HCl, pH 8.0; 60mM MgCl2, 100mM dithioerythritol, 20mM spermidine, 100mM NaCl, 1U/ml RNase Inhibitor
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