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联硕生物
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10ml
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文献和实验4冻干品用缓冲液稀释成约10000 cpm·100-1 ·u1-1。 (4) T4抗血清应用液 将T4抗血清(即抗体)冻干品按药盒要求的滴度稀释,放4℃冰箱备用。 (5) 免疫沉淀剂 用分子量6000的聚乙二醇(PEG)60 g溶解于缓冲溶液中,使体积为200 m1即30% PEG溶液,放4 ℃冰箱备用。 [ 仪器 与器械] γ-计数仪、微量加样器及塑料吸头(50 ?l,100 ?l
孵育10min。 6) 室温750g离心10min,小心抽吸PEG/CaT溶液,颠倒管,轻叩管壁以排出多余的PEG/CaT溶液。 7) 用150ulSOS培养基悬浮转化细胞,室温孵育20min。 8) 加入850ul1M山梨醇,接下来涂板。 2. 涂板:毕赤酵母去壁细胞需要铺在顶层琼脂糖或琼脂上,以防止在选择前被裂解 1) 接第8步,取100-300ul去壁细胞-DNA,与10ml融化的RD琼脂糖混匀倒于RDB平板
状态后,可用分离试剂结合的配体(B)与未结合的配体(F)分离,用计数器计数结合部分(B)标本中的HcG量可通过比较标本B的计数与标准品的计数(标准曲线)求得。(1)125碘一尿HCG(PEG)药盒组分包括:HCG标准管6瓶,冻干;HCG抗体(蓝色)1瓶,冻干;125碘一HCG(红色)1瓶,冻干;正常兔血清5瓶,冻干;磷酸盐缓冲液1瓶,溶液;PEG 1瓶,溶液。曲线范围50~200Iu/L。标准曲线:以标准浓度为横坐标,以结合率为纵坐标,绘制标准曲线,依此求得标本的HCG一β浓度。正常参考值:保存:2~8℃
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