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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RT
- 库存:
99
- 供应商:
联硕生物
- CAS号:
115-39-9
- 规格:
60ml
纯度:0.4%
保存温度:RT
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文献和实验水 12ml 10×BamHI缓冲液 2ml 质粒pUC118 5ml BamHI 1ml 总体积 20ml 2. 用手指轻弹管壁,使各种试剂混匀,快速离心,以集中溶液。 3. 置37℃水浴60~120 分钟。 4. 加入5ml溴酚蓝指示剂点样缓冲液,按实验三方法电泳,观察酶切反应结果,鉴定酶切效果。 【提示】 实验操作中注意的问题 1. 酶切反应用的Eppendorf管和吸头
或者使用微量进样器直接在靠近点样孔底部的位置点样。 (5)冰浴中,恒压60~80V电泳约1.5h,至溴酚蓝指示带距底部约3cm处。 3、转膜 (1)电泳结束后,取出凝胶,浸入预冷的0.5XTBE缓冲液中。 (2)转膜所用的膜以及滤纸也需用0.5XTBE缓冲液浸湿(也可以事先用0.5XTBE缓冲液浸泡10min)。 (3)组装“三明治”,从负极(黑色)到正极(红色)依次为:滤纸、胶、膜、滤纸。 (4)组装转膜装置,确保装置所有正负极都连接正确。(这一点大多数人都知道,但在实际操作中往往
.含pUC18质粒的大肠杆菌 附:试剂的配制 1.溶液Ⅰ 50mmol/L 葡萄糖 5mmol/L 三羟甲基氨基甲烷(Tris) Tris·HCl (pH8.0) 10mmol/L 乙二胺四乙酸(EDTA)(pH8.0) 2.溶液Ⅱ 0.4 mol/L NaOH, 2%SDS, 用前等体积混合 3.溶液Ⅲ 5mmol/L 乙酸钾 60 ml 冰乙酸 11.5 ml 水
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